利用恒溶氧．补料分批技术高密度培养大肠杆菌生产重组人骨形成蛋白-2A

摘要:

对表达人骨形成蛋白－2A(BMP－2A)的重组大肠杆菌YK537／pDH－B2m在500ml摇瓶中进行了培养条件的摸索实验，继后用5L自控发酵罐进行分批培养和分批补料培养，以获取rhBMP－2A两种培养方式结果比较表明，在培养过程中保持30％～40％左右的溶解氧和限制性流加葡萄糖可以使BMP-2A的含量达到2．78g／L，最终菌体密度为OD₆₀₀53(相当于干菌21．2g／L)，重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的25％。该培养技术的关键是：(1)在培养过程中保持适当的溶解氧；(2)限制性流加葡萄糖；(3)42℃起始诱导的时间控制在对数生长中期，持续表达时间为4h；(4)细菌持续生长的比生长速率控制在0．3h -1左右。

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