以甲醇酵母(Hansenula polymorpha)表达系统的Yip型表达载体pJF5-1为基础，通过引入宿主来源的一个rDNA随机顺序和由SV40早期启动子控制的G418抗性基因(neo)及对野生型标记基因Hpleu2启动子大部分上游序列的缺失，构建了一个高拷贝整合型表达载体pMIRH。有关转化、筛选和拷贝分析等试验结果表明，由pMIRH可产生含高拷贝数载体的转化子，并可通过由leu2+筛选和G418抗性筛选所组成的二级筛选方法富集这些含高拷贝数载体的转化子。有关完整DNA和消化DNA Southern杂交分析结果进一步表明，上述高拷贝数的载体以串联重复排列的方式整合于宿主基因组。
李黄金 龙綮新 林志雄 涂桂洪 王珣章. 甲醇酵母表达系统高拷贝数整合型表达载体的构建[J]. 生物工程学报, 1998, 14(4):
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