用0.15%乙烯利诱导烟草幼苗后,提取叶片总RNA,并通过反转录及多聚酶链式反应(RT-PCR)扩增出β-1,3-葡聚糖酶基因的cDNA。将其克隆至载体pBluescript SK后,完成了此基因的全序列分析。测序结果表明:所克隆的cDNA除第1008位碱基与所报道的不同外,其它序列完全一致。为制备抗血清,构建了此基因的大肠杆菌表达载体,并在表达宿主菌BL21(DE3)plysS中得到表达,进行了Western blot分析。同时,还构建了此基因的植物表达载体。
蓝海燕 田颖川 张丽华 刘桂珍 王兰岚 陈正华. 烟草β-1,3-葡聚糖酶cDNA克隆、大肠杆菌表达及植物表达载体的构建[J]. 生物工程学报, 1998, 14(4):
通信地址:中国科学院微生物研究所 邮编:100101
电话:010-64807509 E-mail:cjb@im.ac.cn