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t-PA cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达
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    应用PCR方法，在t-PA cDNA 5′端引入合适的限制酶位点和酵母分泌信号肽，与酵母表达载体pPIC9重组，构建表达质粒pSTEY，利用LiCl转化法转化酵母菌YS108，在MM和MD平板上筛选表型，PCR筛选t-PA cDNA与酵母染色体整合而形成的阳性克隆，阳性克隆经甲醇诱导表达后，用SDS-PAGE证明表达产物的分子量为6kDa左右，用酪蛋白板溶圈法测定tPA的活性。Mut-s表型菌表达产物活性最高为2 500IU/ml,Western blot证实表达产物具有天然t-PA分子的免疫原性。

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引用本文

涂宣林 朱运松 宋后燕. t-PA cDNA的克隆及其在毕赤酵母中的表达[J]. 生物工程学报, 1998, 14(4):

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