纤维素多孔微载体的制备及其用于动物细胞培养

摘要:

将纤维素铜氨溶液喷洒至-40℃的硅油：正己烷=1：4的冷冻液中形成含冰晶的微球，用-30℃、40%的H₂SO₄再生纤维素，并用EDAE盐酸盐修饰其表面，制成适合动物细胞培养的纤维素多孔微载体。利用该微载体培养能分泌尿激酶原(Pro-UK)的重组CHO细胞，在100mL搅拌瓶中换液培养25d，细胞最高密度为6.3×10⁶/mL，尿激酶原最高活性为2325IU/mL，共获28.7mg产品。之后转入1000mL搅拌瓶中培养，可观察到细胞可从种子微载体中自动转移到新微载体中生长繁殖直至所有微载体中都长有细胞。在25d二级培养中，细胞最高密度为7.3×10⁶/mL，尿激酶原最高活性为3108IU/mL，共获含353mg尿激酶原的上清13.7L。在培养后期换用无血清培养基培养，细胞生长及蛋白表达水平正常。

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