江浙蝮蛇神经生长因子在大肠杆菌中的表达及纯化*

摘要:

将江浙蝮蛇(Agkistrodon halys Pallas，A.h.P)神经生长因子(Nerve growth factor，NGF)基因克隆于分泌型原核表选载体pET-22b⁺，以c端融合了6个组氨酸的形式在大肠杆菌B12l(DE3)中进行了IPTG诱导表达。SDSPAGE分析确定有一比理论值略大的诱导表达条带，其表达量占全菌蛋白质的20％左右，且表达蛋白质主要是以包涵体的形式存在。用6mol／L的盐酸胍溶解包涵体后，利用固定化金属离子(Ni²⁺)配体亲和层析一步纯化目的蛋白质，纯度可达80％左右。对该重组肽进行变复性研究。利用PCl2细胞进行生物活力测定，证明表达产物具有NGF生物活力。

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