产肠毒素大肠杆菌的热敏肠毒素B亚基(LT-B)和耐热肠毒素(ST)基因融合及其表达

摘要:

采用基因重组技术构建了表达产肠毒素大肠杆菌(ETEC)的耐热肠毒素(ST)基因和热敏肠毒素B亚基(LT-B)基因融合抗原的疫苗候选株。将ST基因的5’端与LT-B基因的3’端连接，并置于同一阅读框。编码ST的基因是通过PCR从pSLM004质粒中扩增得到的，含有ST的pro序列(其编码ST前体的pro区域)，并应用寡核苷酸定点突变技术将编码ST的第14位氨基酸残基发生突变，使ST的第14位氨基酸残基Ala突变为Leu。在所构建的结构中，于LT-B和proST之间分别插入了不同长度的氨基酸Linkers。表达的融合多肽同时具有ST和LT-B的抗原性，并保留结合GM-1神经节苷脂的能力，且无LT和ST的生物毒性。表达的融合蛋白免疫动物，能诱导产生相应的特异性抗体。

Abstract: