A型肉毒毒素受体结合区Hc在重组SFV复制子载体中的表达

Expression of the Hc Fragment of Clostridium botulinum Neurotoxin Serotype A in Mammalian Cells with Recombinant Semliki Forest Virus Expression System

摘要:

为了在哺乳动物细胞中表达A型肉毒毒素Hc抗原, 构建了含A型肉毒毒素受体结合区Hc基因的基于RNA和DNA的重组Semliki森林病毒(Semliki forest virus, SFV)复制子表达载体。RNA和DNA复制子载体转染BHK21细胞后, 经间接免疫荧光、Western印迹和ELISA检测, 结果表明非分泌型和分泌型的Hc抗原在细胞中都得到了有效地表达; 而且复制子表达载体与辅助病毒载体共转染均可制备高滴度的重组病毒颗粒, 该重组病毒颗粒感染细胞后, 也都能表达Hc抗原。以上结果表明, 基于RNA和DNA的重组SFV复制子表达载体在细胞中均可有效地表达Hc抗原和制备具有感染能力并能表达Hc抗原的重组病毒颗粒。基于RNA和DNA的重组SFV复制子表达载体的构建和含A型肉毒毒素受体结合区Hc基因的重组病毒颗粒的获得, 为进一步观察SFV复制子疫苗的免疫原性奠定了基础, 从而为A型肉毒毒素新型疫苗的研制提供了新途经。

关键词:semliki森林病毒, 复制子, A型肉毒毒素, 受体结合区Hc, 重组病毒颗粒

Abstract:

Expression of the Hc Fragment of Clostridium botulinum Neurotoxin Serotype A in Mammalian Cells with Recombinant Semliki Forest Virus Expression System

Key words:Semliki Forest virus, RNA replicon, botulinum neurotoxin serotype A, C-terminal fragment of heavy-chain receptor(Hc), Recombinant virus particles (RVP)