程勤 沈珝琲 强伯勤 余曙华 吴宁华 陈菊凤 樊汝恭 程小款 李文渌 毛映红 刘尔翔
1989, 5(2).
摘要:从体外培养的恶性疟原虫中分离纯化总mRNA,将其逆转录为cDNA,组入表达型载体λgt11,建立了恶性疟原虫中国海南岛分离株Fccl/HN红内期cDNA库。经大肠杆菌表达后用抑制性单克隆抗体M26—32、F6—c2、F6—D3筛选。杭有27个克隆与M26—32作用、34个克隆与M26—32和F6—C2都反应。对筛选结果进行了分析。这些阳性克隆的表达产物有可能作为疟疾疫苗的组成部分。
1989, 5(2).
摘要:本文将酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)中编码烯醇化酶的基因之—ENO2的上游墩活顺序嵌入穿梭质粒YEpl3上酵母LEU2基因上游—405Hpa I的酶切部位。LEU2为编码β-异丙基苹果酸脱氢酶基因。从而研究了酵母ENO2的上游激活顺序对酵母LEU2表达的影响。实验结果表明ENO2上游激活顺序不论正向或反向嵌八都激活LEU2的表达达四倍左右。有亮氨酸存在的条件下,LEU2的表达受到抑制。ENO2上游激活顺序在对LEU2表达的激活上并不受葡萄糖的诱导。提出了用ENO2上游激活顺序组建高表达系统的可能性。
1989, 5(2).
摘要:我们用杂交瘤技术获得了分秘抗牛生长激素单克隆抗体的细胞系(4B-2)。接种此细胞于小鼠所产生腹水的抗体含量达10mg/ml。经免疫亲和层析方法纯化的单克隆抗体,属1BG1型。将单克隆抗体偶联到Sepharose 4B上,创成了免疫亲和吸附柱,可以从牛垂体匀浆中一步纯化牛生长激素。偶联有50mg单克隆抗体的亲和柱一次可结合3mg牛生长激素。经单克隆抗体亲和层析纯化的牛生长激豢,保持了与兔肝细胞膜受体结合的能力,及在去垂体大白鼠中促进胫骨生长板生长的功能。
1989, 5(2).
摘要:用马铃薯x病毒(Pvx)免疫的BALB/c小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,经3次克隆化后,筛选出3类分泌抗PVx株系特异性的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,该细胞株经传代20代以上,并经液氮冻存一年以后仍表现稳定。3个杂交瘤细胞株染色体数目集中在92—102条之间,其免疫球蛋白亚类均为IgG3,用ELlsA间接法测定细胞培养上清滴度为1:320—1:640,小鼠腹水抗体滴度为1:102400—1:204800,后者比兔抗血清滴度(1:320)高300倍以上。McAb对抗原具有中和作用,中和滴度为1:102。经反复冻融、硫铵沉淀和冻干后,抗体活性无明显变化。
1989, 5(2).
摘要:本文报道了细胞成囊装置的设计及微珠大小的控制方法,首次表明了微珠直径与微珠堆密度的关系,微珠堆密度及克隆满载率的计算方法,观察了杂交瘤细胞在海藻胶中的分布及微囊和克隆大小的关系问题。微囊技术的成功率达到90%左右。这对细胞荧膜工程的深入研究和开发,具有重要意义。
1989, 5(2).
摘要:本文采用原生质体融合技术,把链霉素生产菌——灰色链霉菌No.45 Streptomyces griseus No.45(Lin,Rif‘)同耐高温的不产生抗生素的热灰紫链霉菌T272 Strep-griseus thermogriseoviolaceus T272(Lins,Riff)进行了原生质体融合。以抗性为选择标记,以PEG6000为助融剂,选出了融合体。制备超薄切片后在电镜下观察了原生质体融合的详细过程。在链霉素生物合成受抑制的高温(37℃)下,测定了融合体的抑菌括性,从形态上与两亲株不同的46株融合体中发现6.3%的融合体既有耐高温的特性也有抑菌的活性。
1989, 5(2).
摘要:用海蔑酸钙包埋法将大肠杆菌细胞制成固定化细胞,与1%谷氢酸溶液进行间歇反应,连续搅拌式反应及连续柱式反应生产丫—氨基丁酸。谷氨酸溶液用0.2mol/L醋酸-醋酸钠缓冲液调至pH.4,温度37℃。间歇反应在微生物多用培养箱旋转摇床上120r/mm振荡反应,每批反映6h.100%的谷氨酸可转化为丫—氨基丁酸。连续搅扑式反应在三角瓶反应器中进行,以Gml/h的流速输入底物溶液,输出反应液,转化率达8;%。连续柱式反应在上部膨大、顶端开口的特殊柱反应器中进行,控制流速12ml/h,95%以上的谷氨酸可被转化成Y-氨基丁酸。
1989, 5(2).
摘要:尖镰孢菌(Fusariun oxysporum)33—11是一株青霉素V酰化酶的高产菌株。用二醋酸纤维素固定的该菌细胞裂解青霉素V最适的Ph范围为7.4至7.6;最适的反应温度为45℃至48℃;其酶活性受8-羟基喹啉和EDTA的可逆抑制,Mg2+、Zn2-和Mn2-离子则有激活作用。采用问歇式搅拌裂解青霉素V,测得0.6rnm颗粒度固定化细胞的表观km值为11.7mmol/L。裂解青霉素V的反应活化能为33kJ/mol;底物抑制常数Ks为1950mmol/L;苯氧乙酸和6-APA的抑制常数分别为220mmol/L和270mm0I/L,在裂解反应中.前者是竞争性抑制剂,后者是非竞争性抑制剂。
1989, 5(2).
摘要:本文提出了以普通变形杆菌(proteus vulgaris)发酵生产脲酶的方法。文中对发酵条件进行了系统的研究,使发酵得率达到每毫升培养基8.4u,时间仅需8h。同时还建立了提取和纯化的工艺,使能达到工业化生产水平。临床应用证明该脲酶可代替巨豆脲酶,为脲酶的生产开辟了一条新的途径。
1989, 5(2).
摘要:由酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)和氧电极组成的微生物传惑器用于蔗糖等低分子糖的测定。响应动力学过程分析表明,动态测定法比稳态测定法优越。对醪液中蔗糖浓度铡定,响应时间小于Imin,线性范围0-100mg/L,相对误差为±4%,平均回收率为97%。乙醇和精氨酸对测定有较大干扰,22种氨基酸混合液对测定干扰不明显。传感器经连续使用一个月,500次测定,活力仍稳定,无线性漂移现象。该微生物传感器对低分子糖类的响应选择性顺序为:果糖>麦芽糖>葡萄糖>蔗糖,在以上述糖作为唯一生长碳源培养微生物时,可采用本方法测定其含量。
1989, 5(2).
摘要:模糊集理论的问世为我们进行生化过程的模型化工作开辟了可喜的前景。本文就故障诊断问题,以模糊集理论为基础,提出了一种新的模型化方法。同时,运用这种方法,针队一个工业抗生素生产过程中的染菌故障问题,建立了行之有效的诊断模型。理论分析和现场调试的结果表明,该方法还可作为类似故障诊断问题模型化工作的参考。
1989, 5(2).
摘要:在较宽的操作气速范围内(Uc=0—2d.9cm/s)研究了内径250mm,高4500ram的外环流生化反应器内循环速率随操作气速的变化规律,建立了外环流反应器的流动模型和测定循环速率的新方法——电导脉冲示踪法,解决了环流总阻力系数∑£的测定问题,从理论上推出了循环速率的表达式:Um=[2gHr·Ar—Ad·(Hr·Ar/Ad+Ld——Hr+Ld)2·UG—1+∑ξ]1/3可供该类生化反应器放大时参考。
1989, 5(2).
摘要:
1989, 5(2).
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