摘要:苏云金杆蓠(Bacillus thuringiensis)HD-1的δ-内毒索基因原始克隆THl2和TH48分别含有5．3kb和6．6kb型类同源异族基因。经定点突变改造其5’端，酶切对3’端进行缺失后，在大肠杆菌中仍能表达出有杀虫活性的被修饰的毒蛋白。将上述加工过的基因插入到双元载体pBin437(pBinl9的派生质粒)中，借助辅助Ti质粒(Pal,1404转人烟草，获得了抗卡那霉索的再生植株。经southern印迹和狭槽印迹(slot blot)杂交证明有1-5个拷贝的毒素基因整合至烟草染色体中。Northern印迹法分析结果表明这两类基医都在转基因植株中得到表达。育4株5．3kb类型，3株6．6kb类型的转基因植株对烟青虫有高抗性，与对照相比，这7株转基因烟草植株的杀虫率可达40一50％，并能显著抑制昆虫蜕皮和生长发育，表现明显的抗虫作用。结果表明这两类毒蛋白基因都可在植物中表达并赋予转基因植株以抗虫性。

摘要:载体pTG402与地衣芽孢杆菌噬菌体B1p7经限制酶酶切并连接后转化大肠杆菌。从全部转化子中抽提质粒DNA，转化枯草杆菌后经苗落原位显色选到22个有启动子功能片段的克隆子。利用邻苯二酚双加氧酶对底物的显色反应，测定了15个克隆子的启动子活性，并绘制了启动子功能最强的重组质粒的酶切图谱。此外，还测定了两个克隆子在枯草杆菌各个生长期的表达情况，发现在对数生长后期表达量太增，认为识别这两个启动子的σ因子可能是σ³⁷。

摘要:重组白细胞介素－2(rIL－2)，能维持T－淋巴细胞及CTLL-2细胞株(IL-2依赖)的增殖达一个月之久，细胞总数增加了近千倍。这种作用能被rJL-2专-的单克隆抗体破坏，显示rIL-2的专一性，rIL-2能增加天然杀伤细胞(NK)的活动达46—96％，但其剂量太高时反而起抑制作用，它能诱异淋巴因子激活的杀伤细胞(Lvmphokine Activated Killier，LAK)的生成，它还能杀伤转移性人肺癌细胞及抗NK的HL－60癌细胞株，其杀伤效率达37.06—54．84％。这说明我们获得的rIL－2在上述生物功能方面与天然lL－2相似。

摘要:根据不同聚酮合成酶基因DNA的同源性，利用放线紫红素聚酮合成酶基因act Ⅰ，actⅢ作探针，从螺旋霉索产生菌Str．spiramyceticus U-1941基因文库中检测并分离了螺旋霉素聚酮合成酶基因pCN3H8。限制酶酶切分析表明，其分子量为44kb。通过分子杂交实验，将螺旋霉素聚酮缩合酶基因(与act Ⅰ有同源性)及聚酮氧化还原酶基因(与actⅢ有同源性)进行了定位。pCN3H8 DNA在麦迪霉素产生菌变株Str.mycarofaciens sub sp．68中的表达产物，经紫外光谱分析与麦迪霉素相似。pCN3H8在放线紫红素聚酮缩合酶基因缺陷型变株Str．coelicolor TKl7中的表达产物，不具有放线紫红素的色素，其纸层析谱型与螺旋霉素有显著差别。pCN3H8在变青链霉菌Str．lividans TK24中的表达产物，也具有抗菌活性。将pCN3H8 DNA转化对螺旋霉素敏感的Str.griseofuscus原生质体，获得了螺旋霉素抗性的表达。从转化子中分离得到了质粒DNA pSG3，其分子量为7．0kb，可能是pCN3H8DNA转化Str．grlseofuscus时在体内缺失而形成。再转化实验证明，宿主菌对螺旋霉索的抗性，确实是由于pSG3 DNA作用的结果。含质粒pCG4，pSG3的螺旋霉素产生菌Str．Ambofaciens转化子螺旋霉素的产率明显提高。

摘要:麦迪霉素产生菌生米卡链霉菌(streptomyces mycarofaciens)变株具有丙酰化酶活性，可以将螺旋霉素转化为丙酰螺旋霉素。为了进行丙酰化酶基因克隆，本实验以质粒pIJ702为载体通过鸟枪克隆法将变株DNA片段克隆至变铅青链霉菌TK54(Streptomyces livdansTK54)，经薄层层析和高压液相色谱分析结果表明，在转化子中，N0．9菌株可以将螺旋霉素转化为丙酰螺旋霉素，这证明丙酰化酶基因已在变铅青链霉菌TK54中克隆并得到初步表达，№．9重组质粒插入DNA片段为4．16kb，经southern杂交表明确实来源于变株。此外还构建了N0．9重组质粒的限制酶酶切图谱。

摘要:利用组建的苜蓿尺蠖核型多角体病毒(AcNPV)非融台蛋白基因转移载体将乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)基因成功地插入粉纹夜蛾(Tn)NPV中，HBsAg基因在感染了重组病毒的草地夜蛾(Spodoptera frugiperda)离体细胞以及粉纹夜蛾和蓖麻蚕等虫体中获得了表达，免疫电镜下观察到典型的乙型肝炎病毒表面抗原22nm颗粒。感染重组病毒的蓖麻蚕预蛹每克蛹重可产HBsAg蛋白1．6μg。表达产物经DEAE－纤维素层析得到的HBsAg粗提物可作临床检测用，再经抗体亲和柱层析可得到纯的HBsAg。

摘要:我们分离到了一株产生分泌型青霉素G酰化酶的巨大芽孢杆菌(Bacillus megateriumBM1)。用pBR322作载体，将该菌的青霉索G酰化酶基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coliMcl061)中，得到含有9．9kb插人片段的重组质粒pBmPA4。分析了该质粒的限制酶酶切图谱，并经体外缺失获得含4．9kb插入片段的质粒pBmPA5。pBmPA4和pBmPA5在E·coliMcl061中均能表达，表达受苯乙酸诱导。

摘要:苏云金芽孢杆菌交种Bacillus thuringiensis aizawai 7-29 δ-内毒素基因及其3，末端缺失基因，亚克隆到质粒pUCl9上，构建了Pucf33和Puck63重组质粒。进一步将δ-内毒素基因及其3’端缺失基因，插入到植物表达载pBl121．2质粒中，构建了Pgy61和Pgyck63重组质粒。．用32P标记的δ-内毒素3’末端缺失的KpnI DNA片段的探针，与重组质粒进行DNA—DNA分子杂交，结果阳性。带有全长和3’末端缺失重组质粒，转入大肠杆菌HB101和农杆菌LA4404受体细胞中，其克隆子细胞抽提物，对大菜粉蝶和玉米螟幼虫均具有杀虫生物活性。结果证明δ－内毒素基因不仅能在大肠杆菌HB10l中，而且能在农杆菌LA4404中表达。

摘要:本文报道了在幼畜腹泻双价基因工程菌(K88、K99)的高密度发酵和抗原蛋白基因过量表达的研究基础上生产抗原蛋白疫苗的工艺。高密度发酵的工程菌(K88、K99)发酵液经65℃保温处理、离心除去菌体，清液部分含发酵液中抗原量的80％，加聚乙二醇(至最终浓度为7％)沉淀可回收全部抗原蛋白，加消毒的生理盐水溶解及稀释后分装冻干制成抗原蛋白疫苗。疫苗的组成份主要有分子量为52、36、22、18kd的蛋白。此法制备的双价疫苗不经甲醛处理，保持了抗原蛋白的天然空间结构，因此用其免疫怀孕的母猪、分娩后母猪乳汁中含有较高效价的抗体、能中和肠毒素大肠杆苗，有效地保护了仔猪黄痢的危害。

摘要:在目前制备单克隆抗体的三个主要体系：小鼠、大鼠和人杂交瘤体系中，大鼠系统具有某些特有的优点。本文以制备抗艾滋病毒和抗乙型肝炎表面抗原的大鼠单克隆抗体为例，较详细的介绍了大鼠杂交瘤的特点及大鼠单克隆抗体制备技术。

摘要:用中子通量为1．85×10¹¹—1．56×10¹³N／cm2的快中子辐射生长旺盛的红豆草愈伤组织，然后转移至含30、40、50、60和70％海水的Ls-1固体培养基上进行选择。选择得到的TS-9050、TS-1150和TS-1460三个耐盐变异系，抗盐性有显著提高，并在含70％的海水培养基上保持了分化为再生植株的能力。

摘要:为了配合凝乳酶的蛋白质工程，围绕酶的纯化，结晶和二硫键的化学修饰进行了研究。实验结果表明采用FPLC Mono Q柱代替DEAE-纤维素柱层析可以提高同工酶A，B及其降解组分C的分离效果并缩短纯化时间。以10mg／ml的纯凝乳酶B为出发材料，在4℃1．4—2．0mol／L氯化钠条件下进行培养可以获得外形近似为正立方体晶体。化学修饰的结果证明，凝乳酶的三对二硫键处于酶分子不同的空间部位。0．72mmol／L DTT在Ph6．3条件下能还原处于分子表面的一对二硫键，经溴化氰降解分肽测定为Ｃys²⁵⁰-Cys²⁸³，还原后引起活力下降25％。在二硫键之间引入汞原子其活力与还原酶，羧甲基化酶的活力大体相同，说明Cys²⁵⁰-Cys²⁸³在维持凝乳酶具有活力的空间构象中起着一定的作用。

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