摘要:本文报道了利用BamHⅠ酶解的载体pBR322 DNA与Sau3A部分酶解的假单胞菌Ps．130染色体DNA片段构建重组质粒，并用³²P标记的寡核苷酸探针从3205个含有外源片段的重组质粒中检测得到7株阳性克隆株。进一步经¹²⁵Ⅰ标记的抗体／抗原放射免疫反应、GL－7－ACA酰化酶活力测定以及酶反应产物的纸谱色层分析，由上述7株阳性株中鉴定出3株能在大肠杆菌中表达酰化酶活力的基因克隆株。对该3株菌的重组质粒——pMR 5、pMR 6和pMR-7-DNA的初步凝胶电泳分析表明，pMR 5和pMR 7质粒中插入片段的分子量为6．8kb，质粒pMR 6则带有5．7kb的外源片段。实验还比较了重组质粒pMR 5在8株不同的大肠杆菌宿主菌中，GL－7－ACA酰化酶的表达水平。

摘要:利用Edman降解法，辅之以邻苯二甲醛阻断等技术，在蛋白／多肽测序仪－PTH氨基酸分析仪上微量自动测定了在大肠杆菌系统获得高效表达的重组人γ干扰索、α 2干扰素和白细胞介素－2等多种基因工程产品的N末端氨基酸序列。根据氨基酸色谱分析的原始资料，对上述蛋白质样品的N末端均一性进行了细致分析。在此基础上，借助序列库检索比较等计算机方法检定了这些样品中可能残留的痕量杂质蛋白，并对分析痕量残留蛋白的一般方法进行了讨论。分析结果表明重组人丫干扰素N束端均一；而a 2干扰素和白细胞介素一2的N末端不均一，其中主要含大致等量的N末端带有蛋氨酸与不带蛋氯酸的两种分子，仅在个别送检样品中发现痕量N末端丢失一个氨基酸的分子。通过在序列库中检索所测出的一段八肽疑似序列，推断在一批送检样品中含有痕量的卵清溶菌酶，经进一步纯化样品并测序后得以证实。本文结果为进一步优化和确定有关产品的生产流程并建立产品质量控制的标准提供了重要依据。

摘要:通过磷酸钙共沉淀技术，将含有尿激酶原cDNA的表达载体(pSV₂-PrUK)与含有二氢叶酸还原酶基因的表达质粒pSV2-dhfr-或MMTV—dhfr共转染中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶基因缺陷株(CHO-dhfr^-)。利用选择培养基选择出二氧叶酸还原酶基因表达阳性(dhfr⁺)的转化细胞灶。用溶解圈法测定尿激酶型纤溶酶原激活剂(u—PA)的生物活性，其中两株显著高于其他株细胞，命名为CLF-14和CLF-8，表达水平依次为24Iu／10⁶细胞／48h，16Iu／10⁶细胞／48h。用ELLSA测定CLF一14和cLF-8细胞上清，表现为强阳性，阳性值比阴性对照值(P／N)大于10，CLF-14和CLF-8细胞表达量分别为0．14-o．22μg／10⁶细胞／48h和0．08-O．14μg／10⁶细胞／48h。分泌产物能被抗尿激酶(UK)血清抑制，而不被抗组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)的抗血清和正常兔血清抑制。

摘要:本工作以长白猪为材料，分别用Charon28及EMBL3为载体，构建了猪的基因组文库。用牛生长激素基因为探针对基因文库进行筛选，由两个基因文库中各获得一个阳性克隆λPGH1，λPGH2。其后，以质粒pUCl9为载体对λPGHl进行了亚克隆。通过对亚克隆pPGH的酶切图谱及其Southern杂交结果的分折表明，在pPGH中含有完整的猪生长激素基因。

摘要:经转座子Tn5诱变，获得20株紫云英根瘤菌菌株109胞外多糖(Exopolysaccharide，EPS)缺陷型(Eps-deficient，Exo-)变种。这些变种仍都是原养型，在含不同的碳底物或不同浓度碳底物的固体培养基上，菌落型态均无改变。与亲本菌相比，变种的EPS产量明显降低。所有变种未能在其宿主植物紫云英上结瘤。利用载体质粒pMN2，经Exo-变种与大肠杆菌受体菌交配，通过选择Tn5卡那霉素抗性标记的转移，构建成带有Tn5及菌株109多糖基因DNA片段的R－prime质粒。R-prime质粒能稳定地存在于菌株109中。大部分变种的Exc-表型能被R-prime质粒互补，但R-prime质粒未能使这些Exo-变种恢复有效结瘤的共生能力。根据互补结果，20株Exo-变种分为6种不同的互补群，其中5种互补群的多糖位点在遗传上是连锁的。

摘要:肿瘤坏死因子(TNF)对许多肿瘤细胞具有细胞毒和抑制生长的作用。为进一步研究TNFα的结构和功能，并为临床研究提供rHTNFα纯品。本实验应用杂交瘤技术制备了一组抗rHTNFct单克隆抗体3、H₂、B₃，B₅、E₆、Zl₂、Z₈和Z₂₀)。ELISA结果证实它们鼻rlL－1、rlL-2、rlFNγ、rlFNα₁及E．Coli菌裂解液(MM₂₉₄)无均交叉反应，仅与rHTNFα有反应。Western blot结果进一步证实这组抗体对rHTNFα的特异性。这组抗体具有不同程度中和rHTNFα细胞毒能力。用抗rHTNFα抗体制备的亲和层析柱纯化rHTNFα,可以得到在SDS-PEAG上分子量为17000道尔顿的rHTNFα纯品。

摘要:本文进行了芫荽愈伤组织、胚状体诱导条件的研究和体细胞胚的包埋、萌发以及幼苗移栽等过程的初步试验。在无菌条件下。人工种子的成苗率这82％，移栽到土壤中的成活率达83％以上。

摘要:本文在探索5102－l号抗生素液相色谱HPLc)分析法的基础上，从出发菌株10—22和融合子FR-008的发酵物中均分离出5102—1号抗生素的主要组分，进一步证实融合子FR·008为吸水链霉菌应城变种种内融合的重组子。实验还从融合子FR一008的发酵物中分离和纯化了出发菌株不能产生的活性物质，通过与浓硫酸和浓盐酸反应呈深兰色，紫外可见光谱在403，380，360，340nm处有吸收峰等特征，表明它是一种七烯大环内酯类抗生素。在建立该抗生素中芳香残基的液相色谱分析法时，证明其中含有对氨基苯乙酮残基。用氨基酸分析仪测定经硫酸甲醇醇解和醇解产物再水解后的抗生素样品，表明它含有与已知七烯大环内酯类抗生素不同的氨基糖残基，其详细结构有待进一步研究确定。

摘要:高温放线菌V₄菌株(Thermoactinomyces sp.V₄)产生的β－淀粉酶最适反应温度为70℃，最适pH为6，酶的热稳定性良好，50℃(4h)不失去酶活力，55℃(2h)保持最初活力的92％，酶对可溶性淀粉的水解率达77％，纸层析结果显示水解产物主要为麦芽糖，经旋光测定，水解产物具有β－构型。巯基抑制剂对此β－淀粉酶无抑制作用。V₄菌株同时产生异淀粉酶及少量的－菌一淀粉酶。

摘要:本文提出用固定化酶－化学发光分析法测定葡萄糖并在此基础上构建了一种新型葡萄糖传感器。这种传感器系由固定化酶膜，光敏二极管及醋酸纤维滤膜构成。与其他类型的葡萄糖传惑器相比，它具有灵敏度高、响应速度快、工作稳定等特点，其线性工作范围可达4个数量级，检测下限为O．5ppm，可连续测定200个样品，测定结果与邻甲苯胺法所得结果相一致。

摘要:本文在固定浓度微载体半连续培养rCHO细胞动力学研究的基础上，通过逐步补加新的微载体以不断提高供细胞生长的表面，提高了细胞密度和产物的表达量。建立了流加微载体半连续培养rCHO肿细胞收获HBsAg的工艺，确定了此种培养方式的最大微载体浓度，为建立微载体连续培养rCH0细胞生产HBsAg技术，实现细胞高密度和产物高表达奠定了基础。

摘要:将染料分子偶联于交联琼脂糖凝胶上制成蓝色、红色和黄色等五种层析介质进行血清白蛋白分离的研究。比较了五种染料配基的吸附性能，考察了温度、pH值、蛋白质浓度和无机盐浓度对吸附血清白蛋白的影响。选择了合适的分离条件。从产妇分娩血中用染料配基吸附层析提取了人血清白蛋白(HAS)。一步分离达到电泳纯，回收率为95％，优于传统的盐析工艺。

摘要:借助于刺激响应实验，发现本中试规模(15m³)uASB的布水系统能保证反应器起动后每3．8m²有一个布水点就可使摹质分布均匀；实验验证反应器的床部和层部可分别用两个完全混合流描述，而沉降区则近似于多级串联混合流，并且在床部存在沟流(<12．2%F)和死区(7．3％Vr)，层一床之间存在着反向流(300％F)，三相分离器的分离功能主要由两个循环流和沉降区的作用来完成，其内部污泥的分布与分离模型相一致，分离效率在实验的有机负荷范围内保持在80％一90％。

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