摘要:以Tac为启动子构建了牛凝乳酶原B基因表达质粒pTaAc，转化大肠杆菌JMl05，对数生长期加入O．1mmo1／L IPTG能明显诱导凝乳酶原的产生。基因表达除受IPTG的影响外，也受温度的调节控制。在30℃培养，IPTG存在时，凝乳酶原产量极低j在42℃无IPTG的条件下，基因也能表达。按电泳扫描计算凝乳酶原蛋白占细胞可溶性总蛋白量的12～19％，按ELISA法测定凝乳酶原产量为80～100mg／L，经变性、复性及酸化有活性的凝乳酶产量为14—20mg/L。

摘要:为了高表达产生Era蛋白，借助计算机从Gene Bank中寻找N端几个氨基酸序列与Era相同的蛋白质，选其中能在大肠杆菌内高表达的λEa8．5蛋白，以其基因5’端序列替代天然ern基因5’端序列，从而赋予era基因转录物以强的翻译起始信号，而不改变其编码的氨基酸序列。将此重组era基因置于PL启动子下游、构建得质粒pCE3l，引入大肠杆菌TAPl06，经诱导后大量合成Era蛋白，且其他蛋白质的合成显著被抑制，从而使Era的含量能超过菌体总蛋白量的80％。经简单裂菌、洗涤步骤，就获得具有能特异结合鸟苷酸活性的、电泳单带纯的：Era蛋白。

摘要:用鸟枪法把嗜热脂肪芽孢杆菌313一l(供体菌)染色体上的蛋白酶基因克隆到质粒pPL603上，并在枯草杆菌中得到表达。此基因位于6．6kb的EcoRI酶切片段上，带有重组质粒的枯草杆菌所产生的蛋白酶活性比供体菌株约提高30倍左右。该酶的最适反应温度为75℃，最适pH为7．0左右，是一个中性蛋白酶，在80℃作用30min后仍保留85％以上的酶活。

摘要:以紫云英根瘤菌菌株7653R为材料，制备总DNA，经EcoRⅠ限制酶部分酶解，通过10—50％蔗糖梯度离心，分离到20一30 kb的DNA片段。利用能在革兰氏阴性菌中转移和复制的广谱寄主载体——pLAFRl质粒，构建了紫云英根瘤菌基因文库。通过与苜蓿根瘤菌102l菌株中8．7kb的共同结瘤基因(作探针DNA)杂交，从基因文库中分离到紫云英根瘤菌共同结瘤基因片段。以紫云英根瘤菌不结瘤突变株7653R+1(7653R消除共生质粒)为受体、构建的7653R基因文库(E．Coli C600)为供体，通过协助转移质粒pRK2013(LE392)进行三亲交配，在含四环素的根瘤菌台成培养基(sM)上选择接合转移子。将得到的所有接台转移子混合在一起接种植物，通过植物结瘤试验，分离到含紫云英根瘤菌结瘤基因的重组质粒pRaz15。将该质粒用EcoRⅠ完全酶切，得到25kb左右的外源DNA片段，该片段携带完整的结瘤基因簇。

摘要:本文报道一个快速简便的枸杞转化再生系统。宁夏枸杞的幼茎外植体，能被含非致瘤性Ti质粒载体的根癌农杆菌感染。在该载体双向启动子的一端连有一个npt—Ⅱ基因(新霉素磷。酸转移酶Ⅱ基因)以供选择卡那霉素抗性的转化植物细胞。把选择诱导培养基上形成的愈伤组织转到选择分化培养基后能很快分化出芽点，继而长成完整的小植株。对再生植株的NPT—Ⅱ酶活性检测及DNA分子杂交表明；外源基因已整合到枸杞细胞的核基因组上，并能在植株水平表达出相应的性状。

摘要:由枯草杆菌载体pUBllO和大肠杆菌载体pGEM3构建了两个新的多功能穿梭载体pBE2和pBE3，它们具有强启动子和多酶切位点区。这两个载体能在枯草杆菌和大肠杆菌中复制和表达，是比较理想的载体。

摘要:较适合于植物细胞悬浮培养的培养液体积为三角瓶总容量的1／5至2／5。氧溶浓度的输出随着温度的增加而增加。西洋参细胞培养液的粘性明显大于无细胞培养液。细胞发酵培养较合适的搅拌速度为60rpm。渗透压的增大会明显地提高细胞培养物的皂甙含量，但对细胞的生长不利。本研究为今后设计出适合于西洋参细胞大量培养的发酵罐提供了重要的依据。

摘要:本文研究微载体半连续悬浮培养表达乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的基因工程哺乳动物细胞(Bu3)的工艺过程，建立了细胞在微载体上的生长模型、葡萄糖消耗和乳酸生成模型。实验表明，微载体悬浮培养系统能使贴壁依赖性Bu3细胞达到高密度和产物高表达。

摘要:合成了新的光交联载体PVA—sbQ—GA，通过物理包理和化学键合相结合的办法固定了葡萄糖氧化酶。对SbQ和GA在载体中量及光照时间进行了优化试验，酶膜活力回收达40％。与氧电极结合制成葡萄糖传感器，对其性能进行了测定。

摘要:本试验用均匀设计方法考查了9种培养基组成对L－异亮氨酸产生菌钝齿棒状杆菌(Cory-nebacterium crenatum)All发酵的影响，获得优化配比为；葡萄糖12％，硫酸铵2％，磷酸二氢钾0．1％，磷酸氢二钾O．45％，硫酸镁O．055％，生物索1μg，硫胺素15μg，硫酸亚铁2ppm，硫酸锰2ppm，碳酸钙4％，pH7．0～7．2。在此条件下，菌株A11可产生L－异亮氨酸15．1mg／m1。与正交设计相比，均句设计具有试验次数少，工作效率高和便于分析因素影响等优点。

摘要:超滤浓缩是短梗霉多糖分离纯化过程中的重要工序。本文研究了短梗霉多糖溶液的浓度每超滤速率的关系，推导出新的超滤器计算公式。根据预定的生产规模及工艺条件，可以对超滤器进行设计计算。实验结果表明用这种方法计算的结果是可靠的。

摘要:本文基于作者所导出的用于描述微生物分批和连续培养的数学模型^［6,7］，就单纯形法在微生物生长动力学和能学参数估算中的应用进行研究。根据模型的特点，提出确定目标函数及单纯形初始值的方法，并以大肠杆菌单罐连续培养为例介绍了估算的全过程。

摘要:本文采用解析法对海藻酸钙为载体，以葡萄糖为底物进行酒精连续发酵的管式反应器内所呈现的固定化K字酵母酒精发酵动力学进行了较为系统的研究，建立了由6个方程组成的酒精生成动力学数学模型，并对此模型进行了应用方面的研究。结果表明：此动力学呈现葡萄糖的反竞争性和酒精非竞争性联合抑制的不可逆特征，其数学模型在所涉及的参数拟合及分别在不同反应器和浓度扩展时的发酵过程所进行的实际校验中，最大的算术平均百分误差为13．8l％，在薯干糖化液的发酵动力学应用中，具有平均差为8．28％之良好预测精度，同时，通过模型中参数式计算得葡萄糖抑制的浓度范围为130—450g／L，而酒精抑制的浓度范围是3．07—16．45％(v／v)。

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