摘要:青霉索酰化酶基因(pac)的定位研究表明它的调节基因和结构基因位于3．5kb的HindI—EcoR I片段。本文报道构建一系列质粒pPA 6的缺失衍生物，并测定这些缺失对pac表达的影响。结果表明调节基因位于pac结构基因内的spb I—Pvu I片段。SphⅠI—PvuⅡ片段克隆到质粒pTzl8u，所得质粒pPA57转化到青霉素酰化酶产生菌E．ColiD816，观察sphⅠ—PvuⅡ片段对染色体pac基因表达的影响。结果表明在sph Ⅰ—PvuⅡ片段内的调节基因反式调节pac基因表达。计算机分析表明在sph Ⅰ—PvuⅡ片段内有两个ORF是编码调节蛋白的可能候选者。Pac调节基因的精确定位正在进行中。

摘要:根据大肠杆菌中核糖核酸酶Ⅲ(RnaseⅢ)含量很低的原因是RnaseⅢ能作用于自身基因(rmc)转录物5’端、负反馈调控其自身合成，设计RnaseⅢ高表达的方案。去除rnc基因5’侧能转录生成可被RnaseⅢ降解的RNA结构的序列，保留整个rnc基因及其5’侧的天然翻译起始序列，将之置于λPL启动子控制下，所构建的质粒在大肠杆菌中经诱导后高表达出：RnaseⅢ，其含量达细胞总蛋白质量的65％以上，并在菌体内形成包涵体。利用RnaseⅢ溶解度变化的特点，在低温、低盐条件中裂菌，并洗涤沉淀，在室温、高盐条件下溶解、过Q－sepharose FF柱，获得具有良好活性、电泳纯的RnaseⅢ，收获量为10－12mg／100ml培养液。同时还发现RnaseⅢ具有特异性结合ATP的活性。

摘要:本文构建了高效表达质粒pPA-3，其在大肠杆菌中表达的重组Frotein A仅含天然Prot—ein A的免疫球蛋白Fc段结台区，表达量达菌体可溶蛋白的20％。sDs—PAGE及western—b1ot结果显示，重组protein A的分子量有4种，即33、32．2，29．5和28．6kDa，其中33kDa与理论计算结果一致，推测其它分子量可能是由于胞内蛋白酶降解所致。一步亲和层析即可将重组Protein A从细胞裂解上清液中纯化出来。火箭电泳及酶联免疫分析结果表明，等蛋白量的该重组Protein A比天然Protein A能结台更多的免疫球蛋白。

摘要:将含有丙酰化酶基因的pIJM9重组质粒转化至螺旋霉素生产菌株S.spiramyceticus获得的转化子，经菌落康位杂交和Southern分子杂交表明，No．6l转化子含有pIJM9重组质粒，其发酵产物经薄层层析，生物显迹试验证明，含有与丙酰螺旋霉素标准品R，值相类似的组分，高压液相色谱分析也证明其产物中有与丙酰螺旋霉素保留时间基本一致的成份，质谱分析结果表明产物中含有与丙酰螺旋霉素Ⅱ相同的组分，这说明No．61克隆菌株是能够直接产生丙酰螺旋霉素的基因工程菌。

摘要:将pSC1o1上的par区域克隆到载体pUC9上，得重组质粒pEC302。将puC9和Hpkc302分别转入E．Coli HB 101，在无机培养基M₉中试验两者的稳定性，结果发现E．Coli IBIoi(：puc9>传代培养40代后质粒几乎全部丢失，而E．Coli HBIOI(pEC302)的质粒全部存在。并且发现质粒的稳定性与宿主菌的recA基因有关。

摘要:通过有性繁殖转移入生长激素基因鲤鱼(P₁)，获得了转基因鲤鱼的子一代(F₁)和子二代(F₂)；外源基因在转基因P1与普通鲤鱼杂交产生的F₁代和转基因F1代自交产生的F₂代鱼中的存在率分别为45．4％和66．7％，外源基因拷贝数在子代个体之间存在很大差异，从每细胞2拷贝到每细胞200拷贝不等；外源基因在转基因鱼子代中仍可表达具有生物功能的产物．人生长激素(h1GH)，并能促进鱼的生长。

摘要:Bam HI部分酶切表达K99抗原的重组质粒pMGK99，将其与相同酶切的含有F41菌毛基因的片段相连接，构建了载有两种抗原基因的质粒pMG611。通过转化大肠杆菌K12HB101、RRI和c600，得到HBlOl(pMG611)、RRl(pMG611)和C600(pMG611)菌株。经甘露糖抗性血凝试验、玻片凝集试验和western blot分析证明K99和F4l两种菌毛抗原在每株菌中均获表达。sDs—PAGE结果表明所表达K99和F4l菌毛亚单位的分子量与其各自野生株所产生的相同，分别是17200和29800Da，ELIsA测定HB101(pMG611)菌株表达K99和K41菌毛抗原的水平与相应出发菌株相同，而高于其野生株。本实验对质粒pMG611表达K99和F41菌毛抗原的影响因素也进行了研究。

摘要:通过大鼠、小鼠对AFM1－BSA抗体应答的比较，选用应答强的大鼠脾细胞作为亲本细 胞，与小鼠骨髓瘤P3X63一Ag8．653系细胞融合制作杂交瘤。经HAT培液选择和RIA的筛选， 克隆化，最终获得生长良好、稳定分泌抗AFMl抗体的5株大鼠－小鼠淋巴细胞杂交瘤细胞 株。以EusA、竞争结合的RIA进一步证明获得的5个单抗是针对AFMl，并与其衍生物 AFB1有明显的交叉反应。5个单抗亲和力的平衡常数K为10⁹－10¹¹l／M，这表明这些单抗 具有组建检测AF试剂盒的潜在实用价值。

摘要:由于胶原蛋白具有与含牛血清培养基中纤粘素(Fibronectin)一类物质相结合的特点，因而胶原是一类来源广泛的可用作制备细胞培养介质的优良基质。经过各种形式的细胞培养试验，以变性胶原为材料合成得到的GT一2微载体可成功地用于Vero，CHO、Bowes以及鱼类细胞的贴壁培养。培养规模包括不同容积的静置培养，滚瓶培养以及1．5L和20L进口和国产生物反应器的大规模细胞培养。

摘要:本文探讨了海藻酸钠的结构组分对微囊强度的重要作用。提出了微囊化批量生产中估算活细胞的方法以及影响满囊比的主要因素等a制备微囊的成功率达到95％以上，满载率可达95％。微囊化杂交瘤细胞在静态培养6—10天后，细胞浓度为8．8×10⁶～2．1×10⁷ceIl／ml微囊。单抗浓度为379μg／m1微囊。微囊化产物经SDS电泳呈现一条或两条蛋白带，表明单抗纯度较高。

摘要:经水稻白叶桔病原细菌(Xanthomonas campestris pv．oryzae)菌株Ks-6-6、Os-213、Yz－32，Yz－34，Yz－24’免疫的BALB／c小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞sP2／0融台、筛选和克隆化，共获得12株稳定分泌该病原细菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株。其抗体分属IgG3和IgG2b亚类。抗体与其它主要病原细菌的种或致病变种无交叉反应，能区分水稻自叶枯病原细菌3个不同血清型的菌株。腹水抗体效价在1：10　³--1：10⁶左右。初步用于抗原决定簇的识别，能区分出6个抗原决定簇，并能将获得的63个菌株分为9个菌株组。

摘要:本文首次报道用诸葛菜(Orychophragmus violaceus)试管苗叶牺为材料分离原生质体，经培养再生了植株。用于原生质体培养的基本培养基为Nitsch培养基，附加1OOmg／L丝氨酸，800mg／L谷氨酰胺和13％的蔗糖，激素成分为0.5mg／L BA，0．5mg／L NAA和lmg／L2，4一D(或0．5mg／L BA和2mg／L 2，4-D)。原生质体的培养密度为2×10⁵／ml。培葬7天的原生质体分裂频率约为40％。在附加O．05mg／L NAA和3mg／L BA的MS分化培养基上，愈伤组织可分化出大量的芽和苗，分化频率为100％。

摘要:本文报道利用海藻酸钠固定化北京丙酸杆菌，及其丙酸发酵的最适条件。最适海藻酸钠和菌体的起始浓度分别为2％和I00％(w／v)。菌体和海藻酸盐混合滴入CaCl₂：溶液中得到直径为3—4 mm球形颗粒。将固定化细胞放入25ml厌氧管中5 g颗粒/15ml培养基。其成分为(％)：葡萄糖1，酵母膏0．5，CaCI₂0.1。30℃静置培养产生大量的挥发酸，丙酸对乙酸的比例接近10：1。固定化细胞重复利用发酵30次，保持稳定活性65天。

摘要:高产缬氨酸的北京棒杆菌(corynebacterium pekinense)突变株125菌株，在2．6L自控发酵罐上分批培养结果表明，当发酵中后期DO为零时，产酸量较多。也可用kL。值为指标来调节过程的供氧强度，Kla=90．75h^-1时，产酸量最高。同时比较了恒速连续补加葡萄糖液，当F=3．75g／b时，产酸较高。由此获得了该菌株L一缅氨酸发酵的低供氧与恒速补糖的控制模式。总糖量为16．85％的发酵，可使产酸量达38．2g／L，转化率为22．67％。本文对有关试验结果，进行了发酵动力学的分析和讨论。

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