摘要:outhern杂交分析表明在地中海拟无枝菌酸菌u－32染色体DNA和黑曲霉niaD(硝酸还原酶基因)之间存在着明显的同源性。利用异源niaD探针从地中海拟无枝菌酸菌u－32基因文库中筛选得到一个能与niaD杂交的5.0kb的Pst Ⅰ片段。该片段经同位素标记后能与地中海拟无枝菌酸菌u－32染色体上一个相同的Pst Ⅰ片段杂交，位于这一片段上的2．1kb sma Ⅰ—EcoR Ⅴ片段只能与以硝酸盐为唯一氮源的总RNA杂交，而不能与相同条件下以铵盐为唯一氮源的总RNA杂交，这些结果表明，所克隆到的5，0kb Pst Ⅰ DNA片段含有地中海拟无枝菌酸菌U-3z的硝酸还原酶基因。这是好氧细菌硝酸还原酶基因克隆的首次报道。由该酶蛋白分子量推测，其结构基因大小在1．5kb左右，进一步的杂交分析发现在5．0kb的Pstl片段中含有完整的NR基因。用20种限制酶对重组质粒pJLl进行了限制酶酶谱的构建。发现有10种酶在pJLl外源片段上无切点，6种酶为单切点，EcoR Ⅰ与Sma Ⅰ各有两个切点。

摘要:从Protein A基因酶切分离出编码完整的结合IgG的B、C区域(PABC)的相应DNA片段，克隆进噬菌体M1乳通过人工合成寡聚核苷酸引物，突变修饰B、C区域内分别含有的羟胺裂解位点，变As-Gly为Asn—A1a。利用突变修饰后的PBACm编码基因片段，构建了一组含有不同阅读框架的融合蛋白表达载体。进一步分别重组克隆了含人工合成的人胰岛索样生长因子Ⅰ(IGF—Ⅰ)、人和牛生长激素释放因子(GRF)等基因的表达质粒，在大肠杆菌中高效表达出PABC—IGF—l、PABC—hGRF、PABC-bGRF及其衍生型融合蛋白。经SDS—PAGE测定分析，每立升摇瓶的融合蛋白产量可达100mg以上。上述高效表达的PABC融合蛋白，通过固相亲和层析柱一步分离．获得SDS—PAGE鉴定为近均一分子量纯化的PABC融合表达产物。

摘要:从黑曲霉糖化酶高产株T2l合成的糖化酶cDNA，经5’端和3’端改造后克隆到酵母质粒YFDl8上，转化酿酒酵母。转化子的淀粉培养基平板检测，培养滤液蛋白电泳和糖化酶活力分析都表明，含有糖化酶基因表达质粒的酵母转化子能有效地分泌有功能的糖化酶到细胞外。实验证明酵母a园子启动子和分泌信号序列能促使黑曲霉糖化酶cDNA在酵母中表达和分泌．实验还表明．黑曲霉糖化酶原的翻译后加工序列很可能亦能被酵母识别，加工生成有功能的成熟的糖化酶。以上成功为构建有实用意义的淀粉水解酵母工程菌迈出了重要的一步。

摘要:将麦迪霉素产生菌基因文库中与放线紫红索酮基还原酶基因actⅢ有同源性的4·0kb DNA片段克隆到质粒载体pWHM3中，构成重组质粒pCB4。将质粒pCB4转入酮基还原酶基因缺陷菌株——加利利链霉菌ATCC3167l中，得到转化子。转化子发酵产物经TLC和HPLC分析证明是阿克拉菌酮，与加利利链霉菌原株ATCC31133的产物相同，说明麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因互补了加利利链霉菌ATCC31671中缺陷的酮基还原酶基因，使其恢复了产生阿克拉菌酮的能力。4．Okb DNA片段插入方向相反的重组质粒pCBR4在加利利链霉菌ATCC31671中发酵产物经TLC分析证明也是阿克拉菌酮，这说明4．0kbDNA片段中麦迪霉素产生菌酮基还原酶基因具有自身的启动子。对4．0kb DNA片段进行了限制酶酶切分析，建立了其酶切图谱。以actⅢ基因为探针，经分子杂交以及亚克隆和DNA转化实验，将麦迪霉索产生菌酮基还原酶基因定位于BssH Ⅱ—BamH Ⅰ 1．3kb DNA片段上。对1．3kb DNA片段核苷酸序列分析结果表明：此1．3kbDNA片段中含有一个独立的ORF，起始密码ATG，终止密码TAG，含783bp；在起始密码上游有GGAGG5个核苷酸SD序列；此ORF编码260个氨基酸，与actⅢ基因编码的261个氨基酸相似性为77．4%，相同性为66．7％，对麦迪霉素产生苗酮基还原酶基因的可能作用进行了讨论。

摘要:引用广义对数方程描述了两次恒流补料分批培养的全过程。结果表明：过程模拟的好坏很大程度上取决于模拟精度的选择；微生物比生长速度μ及限制底物比消耗速度qs，与微生物细胞中棱糖核酸的含量存在某种定量关系。

摘要:重组质粒pNAR4是由钝齿棒杆菌质粒pNAT65和大肠杆菌质粒pACYCl84构建的穿梭质粒。质粒pNAR4转化不同棒杆菌，在钝齿棒杆菌T6—13和答氨酸棒杆菌l0l47中为结构型不稳定，在钝齿棒杆菌B9中为分离型不稳定。而pNAT65转化谷氨酸棒杆菌10147后，转化于中的质粒分子大小及主要酶切位点与pxz10145相同。DNA杂交实验结果表明．在10147菌中有一种与z10145高度同源的超螺旋DNA组分，而这一组分与pxz10145的来源宿主中的另一小质粒具有相同的分子量。提出了质粒结构不稳定与宿主中存在的pxz10145高度同源的小质粒(超螺旋组分)有关，并提出产生质粒分子结构反复变化原因的假设。

摘要:利用鸡马立克氏病病毒(MDV)1型特异单克隆抗体H19致敏Sepharose 4B—cNBr，从感染重组病毒BP38Ⅱ的昆虫细胞中提纯鸡马立克氏病毒pp38基因重组产物，获得良好效果。提纯的蛋白质在SDS—PAGE中表现出一条分子量约为38kDa的蛋白质条带，在免疫印迹试验中该蛋白质条带也能被单克隆抗体H19识别。利用该提纯的重组pp38免疫小鼠，所制备的小鼠抗血清在免疫荧光染色试验中不仅能与感染重组病毒的昆虫细胞Sf9反应，也能和Ⅰ型MDV型感染的鸡胚成纤维细胞反应。

摘要:以土壤农杆菌C₅₈诱导的长春花冠瘿组织与从长春花茎、叶外植体诱导的愈伤组织进行比较，发现冠瘿组织在生长、总吲哚生物碱含量及药用成份阿吗碱含量等方面都优于愈伤组织。测定了光照、温度、蔗糖浓度及外加L－色氨酸前体等，对长春花冠瘿细胞的生长、总生物碱及阿吗碱含量的影响，为长春花冠瘿细胞培养生产吲哚生物碱的实际应用研究提供理论依据。

摘要:介绍了由十三碳烷烃生产十三碳二元酸的发酵过程，对其中的菌体生长期的代谢过程进行了分析。提出了以CO₂释放率判断菌体生长状况的方法，据此可确定进入产酸期的最佳时间．建立了菌体生长期底物消耗及菌体生长的动力学模型，对模型参数进行了回归估值。并对菌体生长期进行了拟合。结果表明，模型的计算值和实测值吻合得较好，平均相对偏差为2．4％。利用所建模型对菌体生长期进行多种操作条件下的模拟计算，结果表明，提高蔗糖浓度及初始菌体浓度均能显著地提高菌体生长期结束时的菌体浓度。

摘要:从土壤中分离得到一株高温放线菌V4菌株(Thermoactinomyces sp．v4)，经测定能产生热稳定β-淀粉酶。V4菌株经过热诱变获得一株具高活力β-淀粉酶的变异株A61产酶活力从400u／ml提高到1000u／ml。A61菌株产生的β-淀粉酶最适反应温度为60℃，酶的热稳定性良好，50℃保温4小时不失活，55℃保温2小时仍具有最初活力的96%。

摘要:基于作者早期提出的面包酵母细胞循环一代谢模型设计了3次最优控制实验．目的是使发酵终了时的带芽细胞分率FBC趋于极小值。以期提高酵母的耐贮存力。实验成功地得以实施，不仅FBC的终值接近理论上的极小值，而且样品的耐贮存力得到了明显提高。另一方面，发酵力分析结果也表明，面包酵母的质量控制将随产品种类的不同而异。如对速用型鲜酵母的生产，FBC的控制就不宜以极小化为目标。

摘要:以克隆的地衣芽孢杆菌2709碱性蛋白酶编码序列的PCR扩增片段为探针。通过原位杂交从2709基因文库中筛选出两个含有完整的2709碱性蛋白酶基因的阳性克隆：Psci和Psc7。对Psc7中的插入片段构建若干亚克隆后测定了其全部DNA序列，结果显示该插入片段含2709碱性蛋白酶及其信号肽与导肽(Pro—peptide)在内的全部编码序列(1140碱基对)及长度分别为299和832碱基对的上、下游序列，该序列同M．Jacobs等克隆的地衣芽孢杆菌NcIB 6816的subtlisin Carlsberg基因序列显示了极高的同源性。通过枯草杆菌-大肠杆菌穿梭质粒Pbe2将克隆的2709碱性蛋白酶基因转入到蛋白酶缺陷型的枯草芽孢杆菌DB104中，结果表明2709碱性蛋白酶基因在枯草芽孢杆菌中得到了明显的表达。

摘要:用显微注射法导入外源Smtpgh基因的早期免胚进行体外培养，并用PCR技术对单个胚中的外源基因进行了检测，以探讨SMTPGH基因在早期免胚中的滞留情况。研究结果表明早期转基因免胚在Tcl99+10％Fcs培养液中有75％发育到囊胚期；其外源基因在8细胞期前没有丢失，随后有逐渐丢失的现象。到胚胎的发育后期，其外源基因的滞留率接近于整合率。

摘要:近二年报道，在TMV^⑴、PVX^⑵、PEBV^⑶和CMV^⑷等病毒中，利用病毒编码的复制酶(亚基)基因或相关cDNA片段转化烟草，工程植株获得绝对或极高的病毒抗性。大量研究认为：马铃薯Y病毒组的核内含体大分子量蛋白(Nib)是依赖于RNA的RNA复制酶(或核心亚基)，Nlb与上述病毒的复制酶有广泛的同源保守区^⑸。因此，Nib基因的克隆，不但在植物抗病基因工程方面，而且在马铃薯Y病毒组基因组的复制研究方面．均有重要的意义。本文以马铃薯Y病毒组的重要成员番木瓜环斑病毒的华南强株系(PRSV—sM)为材料，克隆了PRSV的Nib基因，并完成其全序列测定和植物表达载体的构建，为探索马铃薯Y病毒组复制酶可能介导的抗病性打下了基础。