摘要:在线监测化学组分的浓度对许多生物过程都是十分必要的。然而，探头需耐高温灭菌的要求和生物体系自身的复杂性给许多分析技术的在线监测带来了困难。近几年，随仪器和数据处理技术的迅速发展，应用红外光谱技术对生物过程的原位或在线监测日益广泛。本文对红外过程分析技术进行了较全面的综述，介绍了红外分析的原理、进展及在生物过程监测中的应用。

摘要:pIJ6021和pIJ4123是链霉菌的高拷贝表达载体，它们携带有受硫链丝菌素诱导的强启动子P_tipA。分别在它们的合适位点插入大肠杆菌质粒的复制子和在大肠杆菌中选择用的抗性标记基因(bla)，得到了两个能在大肠杆菌和链霉菌中穿梭复制、并保持结构稳定的链霉菌表达载体：pHZ1271和pHZ1272。将透明颤菌(Vitreoscillia sp.)血红蛋白基因(vhb)克隆到pHZ1272中，用它转化变铅青链霉菌(Streptomyces lividans),经Western blotting分析和CO结合实验表明，在变铅青链霉菌中表达出了有生物活性的透明颤菌血红蛋白，从而证明所构建的pHZ1272载体具有在链霉菌中表达外源基因的功能。

摘要:将编码雪花莲外源凝集素成熟蛋白的cDNA GNA12和其前体蛋白cDNA GNA34插入到二元载体pBin438的双倍增强子CaMV 35S启动子或二元载体pBcop1的CoYMV启动子下游，分别构建成植物表达载体pBGna12、pBGna34\,pBCGna12和pBCGna34。土壤农杆菌介导的转化再生植株的PCR和Southern blot分析表明，GNA基因已整合到烟草DNA中。Western blot分析发现pBGna34和pBCGna34的转基因植株能有效地表达外源GNA，表达量约占可溶性总蛋白的0.08%～0.15%，并且前体蛋白基因编码的蛋白在植物体内进行了正确的加工；而pBGna12和pBCGna12的植株几乎检测不到外源GNA的表达。有效表达外源GNA的pBGna34和pBCGna34的转基因植株具有较强的抗蚜活性，平均能够抑制桃蚜(Myzus persicae)45%～６０％蚜口密度，有的高达90%以上。在转基因烟草中含双倍增强子的CaMV 35S启动子与韧皮部特异表达的CoYMV启动子介导GNA基因表达具有相似的强度，但它们的抗蚜活性存在差异。

摘要:利用同源模建方法预测了t-PA K1区的三维结构。通过结构叠合确定了t-PA K1、K2区，纤溶酶原K1、K4区及UK K区的Lysine结合口袋。静电势计算及疏水性分析表明，在t-PA K2区以及纤溶酶原K1、K4区与纤维蛋白裸露的Lysine之间存在明显的静电势互补和疏水面契合。确定了影响Kringle区结合口袋与Lysine亲和的重要氨基酸，分析了t-PA K1区、UK K区不能结合Lysine的原因，由此设计了具有Lysine亲和力的新型t-PA K1区及UK K区突变体。利用模拟残基突变技术预测了突变体的结构变化，分析了突变后t-PA K1区及UK K区与Lysine亲和力的变化，初步在理论上肯定了设计方案的合理性。

摘要:环状芽孢杆菌(Bacillus circulans)C-2总DNA经PstI部分酶切后分离2～10kb的片段，插入质粒pUC19的PstI位点，转化大肠杆菌(Escherichia coli)，利用几丁质平板从约8000个重组子中筛选到一个几丁酶基因阳性克隆(命名为pCHT1)。用12种限制酶对重组质粒进行的酶切分析表明，重组质粒中的插入片段长3.0kb，其中各有一个KpnI,SacI和SspI位点。把该克隆片段反向插入pUC19的PstI位点所得到的重组子同样具有几丁酶基因表达活性，说明此片段含有一个完整的几丁酶基因，其自身的启动子能被大肠杆菌转录系统所识别。Southern杂交证实了该片段来自于B.circulans C-2基因组，且以单拷贝形式存在，它不能与来自于其它7株几丁酶产生菌的总DNA杂交。

摘要:乙烯在跃变型果实的成熟过程中起着触发呼吸跃变和促进果实成熟的作用。细菌来源的1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)脱氨酶能降解乙烯的直接前体ACC，从而抑制植物体内乙烯的合成。我们用PCR方法从假单孢杆菌中克隆到ACC脱氨酶基因并通过农杆菌介导的方法将其转入番茄(Lycopersicun esculentum)中。再生植株经Southern blot检测证明，ACC脱氨酶基因已整合到番茄基因组中并稳定表达。转基因番茄果实成熟期的推迟时间与体内乙烯的抑制程度有相关性。转基因番茄植株乙烯的合成降低80%左右，果实在离体条件下可保鲜75d左右。研究ACC脱氢酶基因在植物体内的作用可阐明高等植物体内乙烯的作用机理并为培育耐贮藏果蔬品种打下基础。

摘要:为了阐明牛凝乳酶的第二个发夹结构中的Ⅵ型β-转角的功能，利用基因突变技术，将该转角的氨基酸残基(Leu20-Gly21-The22-Pro23-Pro24-Gln25)改为(Leu20-Gly-Gly-Gln25)、(Leu20SerGlyGln25)或(Leu20GlySerGln25),得到3个突变牛凝乳酶原表达质粒Pmcgg,Pmcsg和Pmcgs。除Pmcgs不能在大肠杆菌中表达外，Pmcgg和Pmcsg均能以包含体的形式进行表达，且表达水平与野生型相当。像野生型凝乳酶原一样，Pmcgg和Pmcsg的表达产物经过变性复性，均能自活化为假凝乳酶，而且复性后的酶原突变体在DEAESepharose CL6B上的柱行为与野生型相类似，但突变体假凝乳酶的凝乳及水解酪蛋白活性均明显低于野生型。说明突变对酶原的折叠影响较小，但对酶的催化效率影响较大。

摘要:裸燕麦成熟胚在IN_６培养基上诱导培养，初始愈伤组织为白色、瘤状、外软内硬、易分化植株的非松脆类型。当在IM_１～IM₄培养基上进行循环式调控培养，经7～8个月，初始愈伤组织转变为浅黄色、小颗粒状、生活力强的松脆型胚性愈伤组织。将胚性愈伤组织置于液体培养基中悬浮培养，得到分散性好、生长快的悬浮细胞系。悬浮系经分化培养获得了再生植株，移栽成活率达95%以上。

摘要:利用Tn5定位诱变方法，对质粒Pjb-B5进行Tn5插入诱变，得到10个Tn5在5.9kbB5外源片段上有不同插入位点的质粒TN1-1,TN1-12,TN2-2,TN2-3,TN3-1，TN4-1,TN9-|1,TN10-1,TN13-1,TN14-1。将Tn1-1等分别转移到已经含有不相容质粒Pph1ji的紫云英根瘤菌107菌株中，使之发生同源变换。通过抗性选择及表型鉴别，筛选到3株菌落表型干燥(Muc^-)的酸性胞外多糖(EPS)合成缺陷菌株(Exo^-)107(TN2-2),107(TN10-1),107(TN13-1)\.Southern杂交分析证明这3株变种的Tn5插入确实是同源交换而不是转座产生，表明经过适当改良的Tn5定位诱变法可以应用于紫云英根瘤菌Exo-变种的筛选。

摘要:4个马铃薯栽培种和4个野生种叶肉原生质体黑暗中进行紫外线辐射处理。观察了不同剂量紫外线照射对原生质体分裂生长的影响。S.demissum,S.tuberosum,S.bulbocastum,S.phureja和S.brevidens最低失活剂量分别为8min,5.5min,4.0min,2.0min和15min。３种紫外线照射方式中，“15w,60cm”照射方式失活效果最好。刚分离的原生质体对紫外线最敏感，随着原生质体培养进程，其紫外线抗性逐渐增强。基因型、倍性水平、原生质体体积对原生质体紫外线失活剂量有影响。

摘要:利用自然质粒pSC101par位点的分离稳定性功能，构建了含par位点的质粒pSJM4和pSJM3，通过在同样宿主E.coli HB101中的稳定性比较研究表明，不含par位点的重组质粒pSJ3很不稳定，E.coli G3(pSJ3)在培养到第10代时已开始出现pSJ3的丢失，到培养至50代时则已全部丢失；而含par位点的重组质粒pSJM3则表现得十分稳定，E.coli G3-1(pSJM3)经70代培养，仍无明显的质粒丢失现象，其稳定率保持97%以上。通过对不含par和含par的非重组质粒pUC18和pSJM4的稳定性比较也获得同样的结果。通过对E.coliG3(pSJ3)和E.coli G3-1(pSJM3)的产酶活性比较研究表明，G3-1菌株明显高于G3菌株，说明我们构建的重组质粒pSJM3上的par位点功能不仅没有因外源基因的表达而受影响，而且有利于外源基因的表达。

摘要:利用PCR反应、DNA测序、基因重组等技术，构建了两个表达人粒细胞集落刺激因子cDNA的重组质粒pED－GCSF和pEF－GCSF，两质粒分别转染COS7细胞作瞬时表达，转染CHO－dhfr－细胞作稳定表达。结果两质粒在COS7细胞和CHO细胞均获得了表达，pED－GCSF转染COS7细胞48h、72h的表达量分别为5.2×10⁴pg/ml和2.3×10⁵pg/ml，pEF－GCSF转染COS7细胞后48h、72h的表达量分别为2.8×10⁵pg/ml和1.4×10⁵pg/ml。转染CHO－dhfr－细胞，随着加入的氨甲喋呤(MTX)浓度升高，CHO－dhfr+克隆数减少，但平均每个克隆的rhG－CSF表达量升高，在0.5μmol/L MTX下最高表达rhG－CSF细胞株的量是4.46μg/ml/3d。且表达的rhG－CSF注射小鼠腹腔可提高小鼠外周血白细胞的数量。

摘要:对苏云金芽孢杆菌的培养基配方进行室内摇瓶优化筛选，首先用摇瓶培养筛选到Ⅱ号培养基，在此配方的基础上，将培养基组分划分为氮源、碳源及无机盐三因素，采用三因素二水平正交旋转组合设计的方法进行培养基优化组合研究，建立其芽孢产量依氮源、碳源、无机盐的响应面方程。借助此方程获得响应面最佳点即培养基各组分的最佳配比。实验结果表明，该方法是苏云金芽孢杆菌培养基优化中十分简便、实用、快速的途径。此外，对其间歇发酵过程也进行了初步考察。

摘要:运用广义对数方程拟合不同初始木糖浓度(4.73～94.71g/L)下的木糖醇发酵过程，借助于均匀设计综合考察构建神经网络时第一、二隐层单元数、学习速度、初始权矩阵对模拟结果的影响及不同的初始状态变量对木糖醇发酵过程的影响，建立了一个能够很好地用于不同初糖浓度下木糖醇发酵状态估算和过程预测的四层6-7-6-3拓扑构型的神经网络模型，提出了对改善木糖醇发酵有指导意义的优化方案。

摘要:研究了酵母发酵法生产麦角固醇的过程中，菌体生长、糖消耗、酒精生成与消耗以及麦角固醇合成的动力学。提出了两段动力学模型，模拟值与实验值吻合较好。

摘要:构建了质粒pIJ4083Mpro、pIJ4083\|pro\,pWLD8和pFW3。在浅青紫链霉菌TK24中，启动子探针质粒pIJ4083上的邻苯二酚双加氧酶基因(xylE)不能被透明颤菌血红蛋白基因(vgb)的启动子带动转录，表明vgb启动子在链霉菌中无作用。TK24中，pWLD8和pFW3均能表达透明颤菌血红蛋白(VHb)，pWLD8上可能是由Plac带动vgb的表达；pFW3上vgb基因去掉了非必要部分，克隆在PCR扩增得到的glnA启动子下游，两者连成嵌合基因。

摘要:本研究以非放射性标记的猪乳铁蛋白(Porcine Lactoferrin简称PLF)cDNA 为探针，通过染色体原位杂交法，对PLF基因进行了染色体定位。实验中采用金胶抗体技术并结合使用银增强系统，提高了方法的灵敏度。利用染色体的组型分析，对杂交点的分布进行统计学分析。52%(26/50)的分裂相在第2号染色体具银粒分布，实验结果表明：PLF基因定位于猪2号染色体2q¹²区域。

摘要:在摇瓶条件下研究了葡萄糖、铵盐、磷酸盐对林可霉素产生菌林肯链霉菌的生长及林可霉素生物合成的影响。发酵过程中林可霉素的合成主要发生在菌体生长期，逐渐下降。使用6%的葡萄糖未发现通常所说的“葡萄糖效应”。0.2%铵盐有利于细胞生长，但0.8%NH+4对林可霉素的生物合成具有抑制作用。发酵48h后补加0.6% NH^＋_４，对林可霉素的生成没有显著影响。0.05%～0.1%磷酸盐对林可霉素合成具有较强的抑制作用。并就磷酸盐对菌体由初级代谢转向次级代谢的作用作了初步考察。

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