摘要:在植物基因工程研究中，有时外源转化基因和植物中同源的内源基因的表达均被抑制了，这种现象被称为共抑制。引起该现象的原因包括许多因素，有外源基因和与之同源的内源基因RNA的转录量，DNA的甲基化，T-DNA的结构形式，RNA依赖的RNA聚合酶，非正常RNA以及非等位配对等。其具体机制仍不清楚。最近的研究结果表明转基因植物对病毒的抗性在某些方面与共抑制有相似之处。两者都表现为外源转化基因转录水平很高而稳定RNA的水平很低。本文综述了这方面的最新研究进展。

摘要:以含Bt杀虫蛋白基因(单基因)烟草和常规烟草为对照，系统测定了含Bt与豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)蛋白基因(双基因)的抗虫烟草对棉铃虫(Helicoverpa armigera)不同龄期幼虫的杀虫活性.结果表明：1～3龄幼虫取食转双基因烟草3d后死亡率为80.5%～99.3%，取食6d后死亡率达100%，均显著高于转单基因烟草。2龄幼虫取食转基因烟草3d后转至正常饲料，转双基因烟草对幼虫死亡率、存活虫体重、化蛹率和化蛹时间等生长发育的影响，均显著高于转单基因烟草。

摘要:以日本血吸虫mRNA为模板，用RTPCR法快速克隆到一大小约600bp的DNA片段，DNA序列分析证实，所扩增到的DNA片段中含有日本血吸虫22.6膜相关蛋白(Sj22.6(Ch))基因，将该基因重组到表达型质粒pGEX-4T中，表达的GST融合蛋白分子量约48kD，用谷胱甘肽琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化的重组蛋白不仅纯度好，而且得率高，纯化产量可达40mg/L培养物，免疫试验结果表明该重组蛋白具有良好的抗原性，为其在血吸虫病抗感染中的免疫作用研究创造了条件。

摘要:利用CM纤维素离子交换层析法，从宿主细胞枯草芽孢杆菌MI113中纯化了嗜热脂肪芽孢杆菌HY69的耐热金属蛋白酶基因的表达产物，达电泳纯。该酶的最适反应温度为70℃，有着较好的热稳定性和极高的盐酸胍抗性。70℃的半寿期为45min。在3mol/L的盐酸胍中变性20min，仍残余近40%的酶活。利用凝胶过滤和SDSPAGE，测定其分子量均为27 000±1 000。通过CD光谱得知，该酶含有66%的α-螺旋，28%的β-转角，6%的无规则卷曲，无β-折叠。利用CD光谱和荧光光谱研究了该酶在盐酸胍变性过程中的构象变化，推测其主要是通过增加包装效率，减少无规则卷曲来提高酶的稳定性。

摘要:对抗人纤维蛋白二聚体单链抗体与scu-PA-32K融合基因的表达质粒进行内切酶切割、拼接和外切酶Bal 31消化，得到了该融合基因的一系列缺失突变体，通过对这些突变体表达情况的研究，将影响表达的关键因素定位于基因的841～851位，可能对应于两个连排的大肠杆菌稀有密码子AGG(精氨酸)，用PCR定位诱变法把这两个AGG均改造成CGT后，融合蛋白的表达量从改造前的2%～3%提高到了约30%。

摘要:将山羊的β乳球蛋白启动子连接人促红细胞生成素基因，构建转基因表达载体。通过显微注射的方法转基因小鼠。经PCR斑点杂交和Southern杂交检测验证，获得4只转基因阳性小鼠，其中3只母鼠哺乳期收集乳汁，经EpoELISA检测为阳性。对4组转基因阳性小鼠的部分子代母鼠，经PCR和Southern杂交分析，又鉴定出6只获得遗传的阳性G1代母鼠以Dot-ELISA的方法检测，其中两只G1代母鼠乳汁中的Epo含量为0.5μg/mL。实验证实，867bp的β乳球蛋白启动子可以指导人促红细胞生成素在小鼠乳汁中表达。

摘要:水蛭素是凝血酶强有力的天然抑制剂。通过改造噬菌质粒并构建水蛭素表达载体pCANTAB 5G8Hir,使水蛭素基因通过接头与噬菌体M13的gp3(197～406)基因片段融合。表达产物在gp8信号肽的引导下到达大肠杆菌周质，在辅助噬菌体M13KO7的帮助下组装到丝状噬菌体外壳上。展示在噬菌体表面的水蛭素仍然具有与凝血酶结合并抑制酶活性的作用，说明展示的水蛭素保持了正确的空间构象和生物学活性。水蛭素在噬菌体表面的功成展示为进一步开展其实验定向进化以及结构与功能关系的研究打下基础。

摘要:用重组昆虫病毒表达系统，在家蚕细胞和虫体表达了抗人小细胞肺癌人-鼠嵌合抗体。重组病毒rNPVL2,rNPVH17及双重组病毒rNPVLH19感染的家蚕细胞和虫体血淋巴中都检测到抗体分子的表达。双重组病毒的双基因共表达部分产物可装配。ELISA分析表明抗体重轻链基因共表达产物具有比单基因表达产物高得多的与小细胞肺癌细胞免疫结合功能。

摘要:通过初筛、单倍体分离、诱变及酵母菌种间原生质体融合技术构建了2株麦角固醇产量明显提高的优良菌株YEF-21和YEF-29。并对YEF-21的培养优化条件进行了研究。结果表明在优化的实验条件下YEF-21的生物量及麦角固醇含量的综合值分别为原始亲株YE227和YE180的1.54和1.55倍。经遗传稳定性分析，没有发现标记基因的分离现象，从而证明获得的融合菌株是遗传稳定的，是具有一定实际应用价值的麦角固醇高产菌株。

摘要:筛选出了愈伤组织生长的最佳培养基；考察了各种理化因子对培养细胞生长及银杏内酯产生的影响；应用生物法和HPLC对愈伤组织中的银杏内酯A和B进行了成功的测试。结果显示，银杏愈伤组织培养物中银杏内酯的含量可达0.01%，属国际领先水平。

摘要:分别抽取诱导和未诱导家蚕(Bombyx mori)蛹脂肪体总RNA进行DDRT-PCR反应。产物于非变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳展开，得到的差异条带扩增后大多可以在2%琼脂糖凝胶上得到一条以上的带。Northern blot证明为阳性的一条带克隆后得到6个阳性转化子，SSCP证明它们含有相同的插入片段。对其中之一进行测序，结果显示片段长241bp，没有发现同源性较高的基因。对此基因的进一步研究有望揭示它在昆虫免疫反应中可能扮演的角色。

摘要:AGG/AGA密码子在proUK基因中出现的频率高达2%，大肠杆菌中现有的编码tRNA UCU的argU基因不能满足proUK高表达的需要。本文研究了argU基因剂量对proUK表达的影响，结果表明带有argU基因的中等拷贝数质粒能促进proUK基因表达。

摘要:巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)AS1.127的淀粉酶基因的全碱基序列已被测定。结构基因由1982bp的单一开读框架组成。由DNA序列推测出的前体酶蛋白由659个氨基酸组成，N-端33个氨基酸为信号肽。成熟酶分子由626个氨基酸组成，分子量为68.676kD。该淀粉酶属糖化型α-淀粉酶。并与枯草杆菌(B.subtilis)168产生的糖化型α-淀粉酶之间有83.3%的同源性。分析发现两种菌产生的酶分子的N-端3/4的同源性为90.4%，而C-端1/4的同源性只有70%。序列排比结果说明在淀粉酶基因的趋异进化过程中，基因突变和遗传重组都曾起过作用。

摘要:从1144株真菌中筛选到一株产木聚糖酶活力较高的焦曲霉(Aspergillus ustus)。该菌株适宜的产酶条件为在4%麸皮液中添加0.5%葡萄糖，0.4%硝酸钠及0.1%氯化钠，30℃振荡培养6d，木聚糖酶活力可达2176 u/mL。酶反应的最适温度为55℃，最适pH为5.5，在pH5～8酶活力稳定。45℃保温1h，酶活力剩余35%。酶水解桦木木聚糖的Km值为4.3×10^-3g/mL,V_max值为4.9mg/(mL·min)。酶解产物以木三糖和木四糖为主，表明该酶是一种典型的内切糖苷酶。

摘要:应用Taq DNA聚合酶(Thermus aquaticus DNA polymerase)直接对RNA进行反转录成cDNA第一链，然后用特异引物进行PCR扩增，结果表明，反转录达到AMV逆转录酶的效果，且可能得到比AMV逆转录酶更完整的cDNA第一链。

摘要:nov基因与肾甲细胞瘤密切相关，在肾母细胞瘤细胞中大量表达，而在正常的成年肾中不表达。通过将Bujard′s tTA调控系统引入QT6细胞系中，同时将novC基因克隆到pUHD10-3质粒中，与pUHD-tTA质粒共转染细胞，诱导novC大量表达(其分子量约为48kD)，建立了使nov基因大量表达的细胞系统，为研究novC基因对细胞的调控机制建立了体外细胞模型系统。

摘要:应用一种新型的pH电极流加葡萄糖方法，用于培养重组大肠杆菌生产人α-肿瘤坏死因子。流加后培养液中菌体OD₆₀₀达到9.0，而α-肿瘤坏死因子的比活保持1.05±0.11×10⁵u/mg。与指数流加方法比较，二者能达到的最大菌体密度相近，而利用pH电极流加葡萄糖更具有设备简单，操作方便的特点。

摘要:将纤维素铜氨溶液喷洒至-40℃的硅油：正己烷=1：4的冷冻液中形成含冰晶的微球，用-30℃、40%的H₂SO₄再生纤维素，并用EDAE盐酸盐修饰其表面，制成适合动物细胞培养的纤维素多孔微载体。利用该微载体培养能分泌尿激酶原(Pro-UK)的重组CHO细胞，在100mL搅拌瓶中换液培养25d，细胞最高密度为6.3×10⁶/mL，尿激酶原最高活性为2325IU/mL，共获28.7mg产品。之后转入1000mL搅拌瓶中培养，可观察到细胞可从种子微载体中自动转移到新微载体中生长繁殖直至所有微载体中都长有细胞。在25d二级培养中，细胞最高密度为7.3×10⁶/mL，尿激酶原最高活性为3108IU/mL，共获含353mg尿激酶原的上清13.7L。在培养后期换用无血清培养基培养，细胞生长及蛋白表达水平正常。

摘要:皇冠草是一种具有重要经济价值的大型观赏水草。以其幼叶为外植体，在MS培养基上，短期内(25d)，直接诱导获得了体细胞胚。对不同的细胞分裂素及其不同组合的体胚诱导效应进行测试，发现：6-苄氨基嘌呤(6-BA，1mg/L)和玉米素(Zt,1mg/L)结合使用效果最好，诱导频率达100%，平均每个外植体可形成4.87个体细胞胚。当在含有Zt(1mg/L)的MS培养基中加入萘乙酸(NAA 0.5mg/L)时，外植体不能形成体细胞胚，而是形成大量的根。在含有吲哚乙酸(IAA，1mg/L)的MS培养基上，成熟的体胚5d后即可发育成完整的小植株。72%的小植株被成功地移栽到了水族箱中。采用HPLC法，对自外植体培养之日起到体胚发生和成熟的各个时期的内源激素含量进行了测定。发现各种内源激素的含量均不断增加，10d后达到对照的2倍左右。IAA含量在培养第10天时达到第一个峰值，第二个峰值出现在25d后；玉米素和玉米素核苷(Zt+ZR)含量在15d后达到最大值(为对照的8倍多)，然后逐渐下降；赤霉素(GA-3)的变化趋势与细胞分裂素基本相同，但到体胚萌发时，其含量已恢复到对照水平；培养10d后的脱落酸(ABA)含量一直保持到了体胚成熟期。

摘要:通过摇瓶正交实验，得出7种营养成分对红霉素生物合成的影响程度，对发酵工艺条件进行了优化研究，找到了红色链霉菌抗噬菌体68#菌种生长的优化组合，得出快速碳源(葡萄糖)与慢速碳源(淀粉)配比为2.64时，有利于红霉素的生物合成。还原糖/氮为20，总糖/氮为80～120时对红霉素发酵极为有利。借助磷酸三钙、沸石对NH+的独特吸附和释放作用，将二者按5∶1混合配成吸附和吐纳效果很好的捕集剂，对发酵液中游离无机氮源进行控制，可使抗生素生物合成提高15%～29%。

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