摘要:介绍60年代以来主要是中国在鱼类克隆研究中所获得的实验进展和成果，包括迄今只能在鱼类中得到的，具有发育“全能性”的核质杂种克隆鱼，和早在80年代初中国就已报道过用体细胞核移植所获得的“克隆鱼”，其记录要比“多莉羊”的报道早15年之久。本文还对过去36年中所获得的有关实验结果进行了分析和讨论并试图联系其它“克隆动物“对其发展前景作些探讨。

摘要:尼可霉素是一种新的抗真菌抗生素，在分离到的20多种活性单组分中，X、Z、I、J为主要生物活性组分。本文介绍了尼可霉素的结构，结构与活性的关系及其生物合成途径中有关基因的研究进展。

摘要:根据Nm23-H1与HbFGF cDNA序列，人工合成一段中间核酸序列，将它分别与Nm23-H1 cDNA的上游引物及HbFGF cDNA的下游引物组成两对引物，通过PCR(聚合酶链式反应)构建出融合基因Nm23-H1/HbFGF，将其定向克隆于质粒载体pBV220上，经诱导，SDS-PAGE分析，表达产物分子量为34kD，表达量占菌体总蛋白的14%，表达产物以包涵体形式存在，ELISA和Western印迹表明包涵体具有Nm23-H1和HbFGF抗原性，然后对包涵体进行变性、复性及纯化处理，取纯化产物进行定性和生物活性分析，结果证明纯化产物具有Nm23-H1和HbFGF的抗原性及生物活性。以上实验为今后进一步研究融合基因Nm23-H1/HbFGF在真核细胞中的抑癌、致癌性质打下了基础。

摘要:为了克隆人SOD-cDNA，构建表达载体，实现其在大肠杆菌中的高效稳定表达，通过抽提人肝组织总RNA，RT-PCR扩增人SOD cDNA，构建含rhSOD cDNA的表达质粒pLY-4/rhSOD，转化大肠杆菌JF1125进行表达研究。结果克隆到的rhSOD cDNA序列与文献报道一致，在宿主菌中获得高效表达，表达水平达68%以上；蛋白复性纯化工艺高效快速，rhSOD纯品纯度达98%以上，比活性达到2529u/mg;为用基因工程方法生产rhSOD打下基础。

摘要:将人胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)基因克隆入酵母分泌型表达载体pPIC9K中，酶切线性化后电穿孔导入酵母细胞进行整合，经G418筛选得到多拷贝转化子，甲醇诱导表达。将人GDNF基因克隆入昆虫病毒转移载体pBacPAK8中，与线性化Bm-BacPAK6修饰病毒基因组DNA共转染家蚕细胞，经体内重组，筛选到重组病毒。用重组病毒感染家蚕幼虫，5d后收集血淋巴。SDS-PAGE和蛋白质印迹杂交结果证实了酵母培养上清液及家蚕幼虫血淋巴中含有GDNF蛋白。活性研究表明，甲醇酵母及家蚕幼虫表达的GDNF蛋白能促进多巴胺能神经元的存活和突起生长。

摘要:将Mn-SOD与抗癌胚抗原(CEA)单链抗体基因(ScFv gene)融合，重组到含T7启动子的表达载体pET-22b(+)中，构建表达质粒pETMnSOD-ScFv，并转化大肠杆菌BL21(DE3)，进行高效表达，表达物占菌体可溶性总蛋白的24%。SDSPAGE和蛋白质印迹图谱显示表达物分子量为45kD与融合基因编码蛋白质的理论值相符。该蛋白质在大肠杆菌中为分泌型表达有利于纯化。RIA测定表明表达产物能特异性的与抗原CEA结合，同时邻苯三酚法测定也表明表达产物具有SOD酶的活性，该融合蛋白为分泌CEA肿瘤的靶向性治疗提供新的途径。

摘要:从霍乱疫苗菌中抽提基因组DNA，用PCR的方法扩增zot基因。序列分析表明，zot基因编码399个氨基酸，其中4个氨基酸与文献报道有差异。将zot基因插入含T7启动子的质粒pET28(a+)构建表达质粒pET-ZOT，转化大肠杆菌BL21(DE3)筛选表达菌株BLZOT。表达菌株经1mmol/L IPTG诱导表达3～5h后，表达大量ZOT蛋白，并形成包涵体。经SDS-PAGE分析重组ZOT蛋白分子量约为47kD，凝胶自动扫描分析表明，重组ZOT约占菌体可溶性蛋白量的15%以上。本工作为进一步研究蛋白多肽类药物的口服奠定了良好的基础。

摘要:α-酰胺酶(α-amidase,α-AE)催化神经和内分泌系统中活性多肽的C-端酰胺化，对多肽的生物活性至关重要。以大鼠心房组织的总RNA为模板，采用RT-PCR技术扩增获得编码α-酰胺酶的cDNA，并进行了克隆和测序。为了使α-酰胺酶能在链霉菌中分泌表达，将其cDNA与链霉菌酪氨酸酶(melC1)信号肽的编码序列融合得到融合基因mel/AE，将mel/AE插入链霉菌质粒pIJ680，获得重组质粒pIJ-mel/AE680。SDS-PAGE和生物活性测定证实，携带pIJ-mel/AE680的重组菌株S.lividans TK54［pIJmel/AE680］能分泌表达α-酰胺酶。

摘要:构建的pTO-T7大肠杆菌高效融合表达载体，调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联；多克隆位点(MCS)包括8个常用酶切位点；可进行融合表达或者非融合表达，根据不同的需要加以选择；融合蛋白N端为T7g10的12个起始氨基酸，C端为His标签；含kan抗性基因作为选择标记。将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆至pTO-T7载体，在E.coli中的表达结果表明，融合EGFP达到菌体总蛋白量的50%以上，90%以上的融合蛋白以可溶性形式存在，融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质。与同时构建的不含Ω序列的pT-T7载体的表达产量的比较研究结果表明，Ω序列在pTO-T7载体中能显著提高表达效率。

摘要:将化学合成的RGD肽(Arg-Gly-Asp)编码寡核苷酸与尿激酶B链cDNA相连成为融合基因后，克隆至原核表达质粒pBV220中，在P-RP-L启动子的作用下，经42℃热诱导，在大肠杆菌DH5α中获得了融合基因的表达，其表达量占菌体总蛋白的9.2%，表达产物以无活性的包含体形式存在。经变复性处理得到纯化的融合基因的表达产物，经Western blotting分析表明产物具有与天然尿激酶相似的抗原性，体外活性分析显示其具有一定的纤溶和抗血小板聚集的活性。