摘要:Sup35是酿酒酵母的翻译终止因子，其朊蛋白结构域在体内外都能形成淀粉样蛋白纤维。由于其高度有序的交叉β-片层构象与其他物种中的淀粉样蛋白纤维相似，因此，Sup35的分子自组装机理的研究可以作为蛋白质错误折叠性疾病及朊病毒生物学等相关研究的理想模型。而Sup35朊蛋白结构域自组装成纳米线的能力在生物技术和纳米材料等方面已得到广泛的应用。

摘要:抗菌肽抗菌谱广、活性稳定，且具有与抗生素不同的抗菌机制，在抑杀病原微生物的同时不易产生耐药性，因而在食品、饲料、医药等领域具有重要的应用价值。基因工程技术是降低抗菌肽生产成本的主要方式，其中融合表达在提高抗菌肽产量方面起到了重要作用。文中综述了抗菌肽融合表达的国内外研究进展，探讨了部分融合标签用于抗菌肽表达的策略，并对今后的发展提出了自己的看法。

摘要:微流控技术是在微米级、纳米级结构中操控纳升至皮升体积流体的技术与科学,具有液体流动可控、消耗试样和试剂极少等优点。近年来，细胞转染技术有逐渐向微型化技术途径发展的趋势，这也给了研究者从微尺度角度审视细胞转染技术过程的新机会。以下介绍了基于微流控技术的细胞转染方法，包括微阵列方式的转染技术、缩微流动空间中的转染、微流控液滴技术应用于细胞转染、微流控注射技术以及微流控电穿孔技术，并阐述了影响转染效率的因素或改善途径。

摘要:七鳃鳗Arg-Gly-Asp (RGD) 毒素肽Lj-RGD3与富含组氨酸糖蛋白HRG具有序列同源性，而RGD毒素蛋白及HRG都具有抑制血管新生的活性，但作用靶点不同。为研究Lj-RGD3结构与功能的关系，对野生型Lj-RGD3及其RGD全缺失突变体Lj-112进行了抗血管新生功能研究。将3个RGD模体的全缺失突变体基因Lj-112全序列合成后构建于pET-23b载体，对野生型Lj-RGD3及突变体 Lj-112蛋白进行IPTG诱导表达，重组蛋白经组氨酸亲和层析纯化；采用MTT法测定野生型和突变体蛋白对人

摘要:大肠杆菌NZN111厌氧发酵的主要产物为丁二酸，是发酵生产丁二酸的潜力菌株。但是由于敲除了乳酸脱氢酶的编码基因 (ldhA) 和丙酮酸甲酸裂解酶的编码基因 (pflB)，导致辅酶NADH/NAD+不平衡，厌氧条件下不能利用葡萄糖生长代谢。构建烟酸转磷酸核糖激酶的重组菌Escherichia coli NZN111/pTrc99a-pncB，在厌氧摇瓶发酵过程中通过添加0.5 mmol/L的烟酸、0.3 mmol/L的IPTG诱导后重组菌的烟酸转磷酸核糖激酶 (Nicotinic acid phosphor

摘要:旨在以果糖和葡萄糖混合物模拟能源作物菊芋块茎水解液发酵生产丁醇。在培养基初始pH 5.5，发酵过程不控制pH的混合糖发酵中，出现了发酵提前终止现象，终点残糖浓度达23.26 g/L，而丁醇产量仅5.51 g/L。进一步对比混合糖及葡萄糖、果糖不控制pH的发酵结果表明，导致这一现象的原因可能是有机酸毒性太大和pH太低。全程控制pH的混合糖发酵结果表明，高pH条件有利于提高糖利用率，但产酸多，丁醇产量较低；而低pH条件下发酵残糖较多，但丁醇产量相对较高。基于此，文中采用阶段性pH调控策略，即将发酵初期的pH控

摘要:为简化谷氨酸发酵补料工艺，提出了一种新型的基于pH的补料方式。考察谷氨酸发酵过程中氨消耗量 (x) 和糖消耗量 (y) 发现，两者之间存在较好的线性关系 (y=7.4744x，R2=0.9989)，以此为pH反馈补料工艺中补料液中葡萄糖与氨的混合比例，能较好地将谷氨酸发酵过程中葡萄糖浓度稳定在12~21 g/L。比较恒定葡萄糖浓度补料工艺与pH反馈补料工艺发现，采用pH反馈补料工艺进行发酵，葡萄糖转化率、谷氨酸产酸速率分别提高了9.06％和17.5％左右，同时发酵周期缩短2 h以上。

摘要:为研究微生物法预处理对红麻秸秆中木质素的降解及后续的红麻纤维素酶促糖化和发酵效率的影响，将白腐真菌Pleurotus sajor-caju接种在红麻秸秆培养基上固态培养，对红麻秸秆进行预处理。经P. sajor-caju培养25~35 d后，有效转化红麻秸秆中的木质素，转化率最高可达50.20％，并提高红麻纤维素的酶促水解效率，糖化率达69.33％~78.64％，与对照组相比提高了3.5~4.1倍。以微生物法预处理后的红麻秸秆样品为底物的同步糖化发酵实验表明，发酵72 h，发酵液中乙醇浓度达到18.35~

摘要:由于新发现的流感病毒抗体CR6261可以中和多种亚型的流感病毒，而且是其VH区结合于流感病毒蛋白HA的保守区，因此该抗体有望成为一种广谱的流感治疗性抗体而备受关注。通过构建真核表达载体pCR6261VH、pCR6261VH-GFP、pCR6261scFv，成功地筛选到在细胞膜上稳定表达CR6261VH、CR6261VH-GFP与CR6261scFv的单克隆细胞系。用流感病毒去感染稳定细胞系，间隔12 h取上清检测病毒血凝效价。结果表明：稳定表达CR6261scFv和CR6261VH-GFP细胞系能够降低病

摘要:为了探讨PCR-测序法在宫颈脱落细胞样品中人乳头瘤病毒 (Human papillomavirus, HPV) 临床检测中的应用价值，采用HPV通用引物PGMY09/11针对HPV L1区基因序列进行PCR扩增，并通过DNA测序法对HPV进行基因分型。对于混合感染样品，利用HPV型别特异性引物PCR的方法进行基因分型。325例临床样品中，228例为HPV阳性，其中66例为混合感染。共发现27种不同的HPV型别，其中HPV 16比例最多，其次是HPV 58和52。高危型HPV检出率随病变程度加重显著性增加

摘要:为研究MED1如何影响血浆脂质代谢，以MED1肝脏特异性敲除鼠 (MED1ΔLiv) 为动物模型，禁食0、24、48、72 h，通过H&E染色切片观察了MED1ΔLiv鼠肝脏的形态学变化，运用甘油三酯和胆固醇酶试剂盒及FPLC方法分析了MED1ΔLiv和对照鼠 (MED1fl/fl) 血浆甘油三酯和胆固醇的水平以及脂蛋白的分布情况。研究结果显示，禁食72 h，与MED1fl/fl和PPARα?/?对照鼠相比，MED1ΔLiv鼠肝脏无脂肪沉积。禁食24、48、72 h，与MED1fl/fl鼠相比，MED1Δ

摘要:II型单纯疱疹病毒 (HSV-2) 糖蛋白D (Glycoprotein D，gD) 在介导该病毒入侵到宿主细胞中起着关键作用。为了更好地研究gD在病毒侵入过程中的作用机制，利用杆状病毒表达系统表达了gD胞外部分区域 (1~285 aa)，通过Ni-NTA亲和层析以及分子排阻层析纯化后，得到的带His标签的分泌型可溶蛋白，用悬滴法对该蛋白进行了晶体筛选，获得了高质量的晶体。晶体生长条件为0.1 mol/L Hepes缓冲液 (pH 7.2)，5％ (V/V) 2-甲基-2,4-戊二醇 (MPD)，10％

摘要:为了进一步研究白介素17受体D (IL-17RD) 在IL-17信号的调节作用，探索是否可以通过单克隆抗体阻断IL-17RD介导的IL-17信号通路而缓解自身免疫疾病，利用昆虫表达载体从Sf9细胞中表达纯化人IL-17RD-ECD蛋白，免疫Balb/C小鼠30 d，取小鼠脾脏细胞并与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，应用有限稀释法进行筛选，经过克隆化后筛选到一株能稳定分泌抗IL-17RD-ECD的杂交瘤细胞株1F8。经过初步鉴定，该细胞株分泌的抗体类型为IgG1+kappa类，经过Western blot

摘要:利用基因工程手段表达了分子量约为24 kDa的重组大肠杆菌单链结合蛋白 (r-SSBP)，通过凝胶阻滞电泳与DNA熔解温度 (Tm) 影响实验表征了r-SSBP与单链DNA (ssDNA) 结合的特性，结果表明，r-SSBP可以与ssDNA结合，并且能够降低DNA的Tm值，同时还能增大含有单个错配碱基的DNA与完全匹配的DNA的Tm值差异，这一特性在提高单核苷酸多态性检测的特异性方面具有潜在的应用价值。此外，将r-SSBP应用于本课题组开发的高灵敏度焦磷酸测序体系中测定已知序列ssDNA模板，结果表明，r

摘要:为了获得大量可溶性人类白细胞抗原F (Human leukocyte antigen F，HLA-F) 和分化簇8α同二聚体 (Cluster of differentiation 8α homodimers，CD8αα) 蛋白并对它们的相互关系进行研究，通过同义突变的方法改变了HLA-F和CD8αα基因序列N端的大肠杆菌稀有密码子，获得了高效表达的HLA-F和CD8αα包涵体蛋白；所表达的蛋白通过稀释法复性后，分别进行了凝胶过滤层析和离子交换纯化。经凝胶过滤层析和native-PAGE检测，推测HLA-

摘要:为了在金膜固相载体上固定肌红蛋白单克隆抗体 (MbAb)，通过在金膜上生长一层巯基酸和巯基醇的混合自组装分子膜 (SAMs)，用原子力显微镜 (AFM) 和X射线光电子能谱仪 (XPS) 分析样品的性质，再以1-(3-二甲基氨基丙基) 3-乙基碳化二亚胺盐酸 (EDC·HCl) 作为催化剂，自组装膜和抗体的氨基发生偶联反应，将抗体固定在金膜表面，并进行肌红蛋白抗原 (MbAg) 的测定。结果显示，通过条件优化实验，发现50 mmol/L的巯基16酸和巯基11醇混合乙醇溶液，60 ℃处理金膜3 h后，再偶联