摘要:麻疹病毒是一种具囊膜的负链RNA病毒，两种主要的囊膜蛋白血凝素蛋白 (H) 和膜融合蛋白 (F) 表达在膜表面负责病毒侵入过程中与宿主受体的结合和膜融合过程。病毒囊膜蛋白与受体的相互作用是病毒侵入宿主的关键步骤，决定了病毒感染能力、种属和组织嗜性。因此，囊膜病毒与受体的结合位点往往成为重要的抗病毒药物的靶点。目前已发现的3种麻疹病毒受体包括CD46、SLAM和Nectin-4。以下将综述麻疹病毒受体的特征及在病毒侵入中的作用、麻疹病毒H蛋白与受体的相互作用机制，为抗病毒药物设计及麻疹病毒作为肿瘤治疗性载体的应用提供理论依据。

摘要:量子点是一种半导体纳米晶体，它可发出激发荧光，具有亮度高、稳定时间长和发射光谱可调节等特性，是同时检测多信号的良好材料。这些独特性质使得它们在肿瘤诊治领域中的应用日益受到人们的重视。对量子点进行功能化修饰，如偶联抗体等活性物质后，可以对肿瘤细胞进行特异性识别及示踪，以实现对肿瘤的诊断和治疗。文中分别从分子靶向识别、淋巴结定位和药物传递等方面探讨了功能化量子点在肿瘤诊断和治疗中的最新进展。此外，还讨论了量子点的毒性以及用于肿瘤检测和治疗的多功能量子点的设计方法，并提出了其实际应用的潜在方向。

摘要:猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV) Nsp7蛋白具有较强的免疫原性，且在美洲型 (NA) 和欧洲型 (EU) PRRSV之间免疫原性差异显著，是抗体分型检测的理想靶抗原。本研究采用原核表达系统分别表达和纯化了NA和EU PRRSV Nsp7蛋白，Western blotting分析表明重组蛋白与相应血清型抗体有较强的免疫反应，但特异性较差，与另一血清型抗体仍存在一定的免疫反应，预示两种血清型PRRSV Nsp7蛋白存在免疫交叉反应抗原表位，全长表达不能用于分型诊断。利用生物学软件分析NA和EU PRRSV Nsp7的相似抗原表位，采用融合PCR缺失其编码序列后，经表达纯化获得NA-?Nsp7和EU-?Nsp7两种截短蛋白，蛋白大小约为43 kDa，Western blotting分析表明NA-?Nsp7和EU-?Nsp7可分别与相应血清型抗体发生特异性反应，且无免疫交叉反应，为NA和EU PRRSV分型抗体检测试剂的研制奠定了基础。

摘要:研究了利用生物催化剂制备 (S)-4-氰基-3-(4-氯苯基)-丁酸。以3-(4-氯苯基)-戊二腈为底物，采用苯酚-次氯酸钠法对实验室保藏的菌株进行筛选，得到一株产物立体选择性较高的菌株赤霉菌Gibberella intermedia WX12，并对其催化特性和发酵条件进行了初步研究。以30 g/L的乳糖和20 g/L的蛋白胨分别为碳、氮源，发酵培养96 h，收集的菌体在50 mmol/L磷酸缓冲液 (pH 8.0) 中30 ℃催化反应24 h，将3-(4-氯苯基)-戊二腈转化为4-氰基-3-(4-氯苯基)-丁酸，产率为90％。将产物化学转化为巴氯芬，手性HPLC分析表明水解产物构型是 (S)，其对映异构体过量值ee＞99％。该产物可以用来合成光学纯的 (R)-和(S)-巴氯芬。

摘要:强启动子对于获得目标产物最大代谢流量来说并不一定是最优的；相比之下，使用多个具有不同强度的调控元件对基因表达进行调控更有可能获得最优的表达强度。为了对比使用多个调控元件和使用强启动子调控萜类合成途径基因表达对β-胡萝卜素生产的影响，并通过对关键基因的组合调控提高β-胡萝卜素的生产。文中使用6个强度差异很大的人工调控元件，对萜类合成途径的8个基因进行调控。对于不同的基因，其最适的调控元件强度各不相同。对8个基因的调控使β-胡萝卜素产量提高1.2~3.5倍。和以前报道不一样的是，文中发现用适当强度的调控元件对dxr、ispG和ispH基因进行调控后，也能提高β-胡萝卜素的生产。对dxs和idi基因的组合调控将β-胡萝卜素产量提高了8倍，最终β-胡萝卜素产量达17.59 mg/g干重细胞。结果表明使用多个不同强度的调控元件对基因表达进行调控比仅使用强启动子调控更为有效，为提高目标产品合成能力提供了一种新的基因表达调控方案。

摘要:利用代谢工程手段理性改造野生大肠杆菌的莽草酸 (SA) 合成途径及相关代谢节点，以构建高产莽草酸的工程菌株。根据细胞代谢网络分析，利用Red-Xer重组系统连续删除了野生型大肠杆菌CICIM B0013的莽草酸激酶基因 (aroL、aroK)，葡萄糖磷酸转移酶系统 (PTS) 的关键组分EIICBglc的编码基因 (ptsG) 以及奎宁酸/莽草酸脱氢酶基因 (ydiB) 并系统评价了基因删除对细胞的生长、葡萄糖代谢和莽草酸积累的影响。aroL、aroK的删除阻断了莽草酸进一步转化成为莽草酸-3-磷酸，初步提高莽草酸的累积。删除ptsG基因使大肠杆菌PTS系统部分缺失，细胞通过GalP-glk (半乳糖透性酶-葡萄糖激酶) 途径，利用ATP将葡萄糖磷酸化后进入细胞。利用该途径运输葡萄糖能够减少PEP的消耗，使得更多的碳代谢流进入莽草酸合成途径，从而显著提高了莽草酸的产量。在此基础上删除ydiB基因，阻止了莽草酸合成的前体物质3-脱氢奎宁酸转化为副产物奎宁酸 (Quinic acid，QA)，进一步提高了莽草酸的累积。初步发酵显示4个基因缺失的大肠杆菌代谢工程菌生产莽草酸的能力比原始菌提高了90多倍。

摘要:由于二芳香基甲酮的位阻大及羰基两侧的取代基差异性较小，对其进行不对称还原是生物催化中具有挑战性的难题之一。文中通过对毕赤酵母GS115基因组序列的分析，发现了一个潜在羰基还原酶基因pascr。将该基因克隆、表达在大肠杆菌Rosetta2 (DE3) 中，通过Ni-NTA对重组蛋白进行了分离纯化，并对酶的性质进行了研究。PasCR专一性利用NADPH作为辅酶，其最适反应pH为6.5；最适反应温度为35 ℃；凝胶层析实验结合SDS-PAGE分析表明PasCR在溶液中以二聚体形式存在。PasCR能够不对称还原位阻较大的二芳香基甲酮类化合物，如4-甲基二苯甲酮、4-氯二苯甲酮、2-氯二苯甲酮等，对4-甲基二苯甲酮的还原产物的ee值达到了85％。

摘要:为了研究灰葡萄孢菌肌糖磷脂酰神经酰胺合成酶 (BcAUR1基因) 的表达及酶活性，采用RT-PCR方法，利用含有FLAG标签以及BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的AUR1特异引物从灰葡萄孢菌中扩增得到BcAUR1基因。将BcAUR1基因与穿梭质粒pYES2重组，得到pYES2-BcAUR1质粒采用醋酸锂转化法导入酿酒酵母尿嘧啶突变菌株Δyor1中，Western blotting检测肌糖磷脂酰神经酰胺 (IPC) 合成酶表达，HPLC检测IPC合成酶活力。结果显示pYES2-BcAUR1在酿酒酵母尿嘧啶突变菌株Δyor1中获得表达，pYES2-BcAUR1转化子IPC合成酶活性显著增高，比空载转化子约提高1倍。低浓度的AbA能够抑制空载pYES2酵母转化子生长，但pYES2-BcAUR1酵母转化子能抵抗AbA对菌体生长的抑制。

摘要:通过易错PCR方法建立了一个鼠肺不同长度的nGLP-1R (从第21个氨基酸开始到第145个氨基酸) 的噬菌体随机突变展示肽库，通过噬菌体表面展示技术检测胰高血糖素样肽1受体N端片段 (nGLP-1R) 在缺失一段或两段基因后是否还具有结合Exendin-4的活性。经ELISA分析发现了一株无结合活性的突变株，命名为EP16。经测序比对，发现EP16缺失了前20个和后10个氨基酸，且第52位色氨酸突变为精氨酸。为确定EP16与Exendin-4无结合活性的原因，重新构建了无前20个和后10个氨基酸的EP16野生型及第52位色氨酸变为精氨酸的全长nGLP-1RW52R与EP16进行对比分析。结果表明，EP16的活性丧失是由保守的第52位色氨酸突变为精氨酸引起的，缺失的前20个和后10个氨基酸没有影响其生物学活性。关键位点单个氨基酸残基的突变可以改变胰高血糖素样肽1受体N端片段整个蛋白质的生物学活性。

摘要:探索用重组8型腺相关病毒载体携带1.3拷贝乙型肝炎病毒 (rAAV8-1.3HBV) 介导的HBV持续感染小鼠模型评价核苷酸类似物抗病毒药物的抗病毒效果。首先，通过将rAAV8-1.3HBV经尾静脉注射到30只C57BL/6小鼠体内，建立HBV持续感染模型并对模型成功率进行检测，将建模成功的27只小鼠随机分成6组。然后采取灌胃的方式给予不同剂量的抗病毒药物恩替卡韦 (ETV) 及拉米夫定 (LAM)，每日1次，连续10 d，后停药15 d，同时设置生理盐水及空白对照组。其中ETV分为高剂量 (1.0 mg/(kg?d)) 和低剂量 (0.1 mg/(kg?d)) 两组；LAM分为高剂量 (500 mg/(kg?d)) 和低剂量 (100 mg/(kg?d)) 两组。检测给药前后和停药前后小鼠模型血清中HBV DNA、HBeAg和HBsAg表达水平并比较变化情况。结果发现连续给药10 d后，各给药组与生理盐水组相比，血清中HBV DNA水平均显著下降，具有统计学差异 (P＜0.05)。停药15 d后，低剂量的ETV与LAM两组血清HBV DNA水平出现反弹，差异存在统计学意义 (P＜0.05)。在整个实验过程中，各组小鼠血清中HBeAg和HBsAg表达水平均未出现明显变化。上述结果表明，ETV和LAM能有效抑制模型小鼠中HBV病毒的复制，而对HBeAg和HBsAg表达水平无明显影响；提示AAV8-1.3HBV介导的HBV持续感染小鼠模型制备简单，成模率高，可有效体现出ETV和LAM抗HBV的作用效果，从而用于核苷酸类似物抗HBV药物的筛查。

摘要:以葡萄糖为原料，三聚磷酸钠为磷酰化试剂，马铃薯磷酸化酶为催化剂，制备1-磷酸葡萄糖。利用Box-Behnken实验设计原理，采用三因素三水平的响应面分析法，以产物含量为响应值考察温度、物料比 (葡萄糖/三聚磷酸钠)、时间3个因素影响。采用氢核磁共振波谱仪对产品进行了分析。结果表明，马铃薯磷酸化酶制备葡萄糖磷酸酯的最佳工艺条件为：温度35 ℃，葡萄糖与三聚磷酸钠物料比为1.35∶1 (mol/mol)，时间19 h。

摘要:油脂水解来源的甘油将是未来发酵工业主要原料之一。文中探索D-乳酸高产大肠杆菌Escherichia coli CICIM B0013-070菌株不同培养温度下好氧与厌氧代谢甘油的特征后，建立并优化了一种新型D-乳酸变温发酵工艺，甘油到乳酸的得率由64％提高到82.6％。另外，在B0013-070中引入了温度诱导型乳酸脱氢酶的转录系统，甘油到乳酸的得率进一步提高到88.9％。

摘要:利用7.5 L生物反应器篮式贴壁培养和全悬浮批式培养CHO工程细胞株表达可溶性肿瘤坏死因子受体II-脂联素球部 (sTNFRII-gAD) 融合蛋白，比较这两种培养方法的产率，以便优化高效表达sTNFRII-gAD融合蛋白的制备工艺。篮式贴壁培养首先小规模培养CHO工程细胞株，待细胞增殖到一定密度后以3×105~4×105 cells/mL密度接种生物反应器贴壁培养3 d，调换成不含血清的LK021培养基继续培养4 d。而全悬浮无血清批式培养则以3×105~4×105 cells/mL密度的CHO工程细胞株接种于生物反应器，连续培养7 d。培养过程实时监测培养条件，维持pH和DO的稳定。分别收集细胞上清，离心去细胞后用Pellicon切相流超滤系统对蛋白进行浓缩，并通过DEAE离子交换柱进行纯化。结果显示，篮式贴壁培养和全悬浮批式培养均成功表达了sTNFRII-gAD融合蛋白，产量分别为8.0 mg/L和7.5 mg/L、纯度分别为95％和98％，从而为sTNFRII-gAD融合蛋白的中试工艺研究提供了一定的基础。

摘要:以具有产业化前景的微拟球藻Nannochloropsis oceanica OZ-1为实验材料，利用碳重离子进行诱变育种，采用Imaging-PAM和酶标仪进行大规模筛选，最终获得两株高生长速率微拟球藻突变藻株 (HP-1和HP-2)，进一步分析显示两株突变藻株 (HP-1和HP-2) 生物量积累较野生型藻株大幅提高，在18 d培养末期生物量分别提高了18％和26％，两株突变藻株油脂产率分别为295 mg/(L·d)和275 mg/(L·d)，而野生型藻株为247 mg/(L·d)。所获两株突变藻株生长速度快、油脂产率高，较野生型藻株优势明显。

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