摘要:为了研制A型塞内卡病毒 (Senecavirus A，SVA) 的病毒样颗粒 (Virus-like particles，VLPs) 疫苗，以SVA田间流行毒株CH-FJ-2017结构蛋白基因序列为研究对象，构建了能够同时表达SVA的3种结构蛋白VP0、VP1和VP3的单个原核重组表达质粒pET28a-SVA-VP031。通过大肠杆菌Escherichia coli表达、亲和层析纯化和体外自组装，获得SVA VLPs。透射电子显微镜鉴定显示，SVA的3种结构蛋白在体外能够自组装成直径约25–30 nm的VLPs，并且动物免疫试验结果表明，该VLPs能够有效刺激豚鼠产生高水平的抗原特异性中和抗体。上述研究结果为SVA VLPs疫苗的研制奠定了基础。

摘要:为制备赤羽病病毒(akabane virus, AKAV) N蛋白的单克隆抗体(monoclonal antibody, mAb)，本研究利用原核表达系统表达了AKAV N蛋白，纯化后免疫BALB/c小鼠，取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合获得杂交瘤细胞，采用间接酶联免疫吸附方法(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)筛选获得阳性杂交瘤细胞。经3次亚克隆筛选得到两株特异性针对AKAV N蛋白的杂交瘤细胞株，分别命名为2C9与5E9。通过ELISA、免疫印迹(Western blotting)、间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence assay, IFA)对其进行鉴定。结果显示，成功筛选到特异性针对AKAV N蛋白的单克隆抗体。IFA发现其与AKAV N蛋白具有良好的反应性，亚型鉴定试剂盒鉴定2C9 mAb重链为IgG2b型，轻链为κ链；5E9 mAb重链为IgG1型，轻链为κ链；ELISA检测效价均为1:4 096 000。本研究成功制备了两株特异性针对AKAV N蛋白的单克隆抗体，为赤羽病诊断方法的开发、疾病的防控以及AKAV N蛋白功能的研究奠定了基础。