摘要:芥菜HDA9是去乙酰化酶家族成员，能通过开花信号整合子 (SOC1、AGL24) 调控开花时间，但其深入的分子调控机制仍不清楚。利用重叠延伸PCR将芥菜HDA9的3个关键活性位点 (Asp172、His174和Asp261) 分别突变为Ala，构建氨基酸位点突变体HDA9D172A、HDA9H174A和HDA9D261A。进一步将突变体融合到pGADT7载体，酵母单杂交表明，HDA9突变后仍能与开花整合子SOC1、AGL24的启动子结合。双荧光素酶系统深入检测发现，尽管HDA9D172A、HDA9H174A和HDA9D261A与SOC1、AGL24启动子的结合仍存在，但作用强度均显著减弱。由此暗示，芥菜HDA9的第172、174和261这3个关键活性位点可在一定程度上调节它与开花整合子的相互作用。这为HDA9开花分子调控及功能解析等深入研究奠定了基础。

摘要:为了解浙江地区稻蛙共养模式下大肠杆菌耐药情况及其传播风险，本研究从浙江省4个不同地区的稻蛙共养基地采集分离泥土、田间水及蛙粪便中的大肠杆菌，进行了16S rRNA测序鉴定，纸片扩散法(Kirby-Bauer,K-B)测定耐药表型，PCR法鉴定耐药基因型与整合子，分析了大肠杆菌的耐药情况，并通过接合转移评估耐药传播特性。结果显示，分离得到的82株大肠杆菌对四环素、磺胺异噁唑、阿莫西林和红霉素表现出较高的耐药率，大多数为多重耐药菌，且富阳分离株的耐药率高于其他3个地区。PCR鉴定结果表明，耐药基因sul1检出率最高，为63.41%，其次是blaTEM、tetA和tetB。在检测的16种抗生素耐药基因(antibiotic resistance genes,ARGs)中，富阳分离株有9种ARGs的检出率高于其他地区。整合酶基因intI1的检出率最高，整合酶阳性菌中共14株菌(34.15%)携带基因盒，存在4种不同的基因盒组成方式，以dfrA1-aadA1和dfrA17-aadA5最常见。接合转移结果显示，14株携带基因盒的供体菌中有4株接合转移成功，接合转移频率在4.32×10−5−7.13×10−4之间。研究表明，4个地区中富阳分离株的耐药情况较为严重为整合子介导大肠杆菌对多种抗生素耐药，并且耐药基因盒可能通过整合子在不同细菌之间传播。本研究对浙江省稻蛙共养环境中大肠杆菌的耐药情况和传播特性进行分析，为保障食品安全提供理论基础。