摘要:采用昆虫杆状病毒表达系统, 制备人细小病毒B19病毒样颗粒(VLPs)。先通过PCR方法合成细小病毒B19衣壳蛋白基因VP2, 将其克隆到pFastBac1质粒, 然后转化含杆状病毒穿梭载体Bacmid的E. coli DH10Bac感受态细胞, 获得重组杆状病毒表达质粒Bacmid-VP2。在脂质体介导下转染Sf9昆虫细胞, 包装重组杆状病毒rBac-VP2。利用rBac-VP2感染Sf9细胞表达B19 VP2蛋白, 通过间接免疫荧光、Western blotting等方法鉴定目的蛋白表达。采用两次超速离心的方法对表达产物进行纯化, 纯化产物在透射电镜下可见直径约22 nm的VLPs。本研究成功制备了人细小病毒B19的VLPs, 为B19感染血清学检测方法的建立提供了参考。