猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达
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河南省重点科技攻关项目(No. 0523010500)资助。


Cloning and Expression of the Pig Skeletal Muscle Musclin Gene
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Important Project of Tackle Key Problems in Science and Technology of Henan Province(No. 0523010500).

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    摘要:

    从人肌肉素基因出发, 在dbEST数据库中进行同源性搜索, 找到七个有较高同源性的Expressed Sequence Tag(DY426490, CF787546, AJ660979, AJ664670, AJ663820, AJ680159, DN106254)。通过拼接和进一步RT-PCR实验验证, 获得猪肌肉素基因全长cDNA序列, 其全长651 bp, 开放阅读框为54~452 bp, 编码有132个氨基酸。同源性分析结果表明, 与人、小鼠和大鼠的肌肉素基因cDNA编码区(CDS)同源性分别为87.2%、77.6%和77.9%。利用克隆出的猪肌肉素cDNA, 构建表达载体pGEX-4T-1-musclin, 并在BL21大肠杆菌中成功表达和纯化了分子量为38.59 kD的融合蛋白GST-Musclin, 并运用蛋白印迹技术进行鉴定。

    Abstract:

    We found seven tag sequence with high homology in dbEST by using human musclin gene, and got its cDNA sequence, which consists of 651bp and the open reading frame was 54~452 bp detected by RT-PCR, encoding 132 amino acid residue protein . The new gene has high homology with that of human, mouse and rat, the rate is 87.2%, 77.6% and 77.9%, respectively; the gene fragment was cloned into expression vector pGEX-4T-1, and the recombinant was transformed into E. coli BL21. Induced by IPTG, the fusion protein GST-musclin, a 38.59 kD protein was successfully expressed in E. coli BL21 and identified by Western blotting.

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引用本文

王伟杰,李宏基,韩立强,王月影,王静,李卫华,林茂旺,台玉磊,张志强,藏猛,王艳龄,杨国宇.猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达[J].生物工程学报,2008,24(7):1248~1252

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  • 收稿日期:2007-11-29
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