摘要:

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摘要:前文报道重组质粒pPAl中9．1kb的EcoRI片段上带青霉酰化酶基因。用16种限制性内切酶消化pPAl，其中ApaI，KpnI，SacI，SacI，SmaI及XhoI等六种内切酶在pPAl上无切口； BamHI，ClaI，Sph I，BglI为单切口；Sal为双切口，AvaI，HindI及PvuI为三切口,EcoRV为五切口。经交叉双酶解法测定各片段的大小，作出质粒pPAl的限制性酶切图。在包含青霉素酰化酶基因的9．1kbEcoRI片段上，BglI有一个切口，AvaI，HindI 及PvuI都有两个切口，而EcoRV有四个切口，SalI，BamHI，ClaIKSphI不切9．1kb的EeoR I片段。HindI切9．1kb EcoR I片段为A(3．5kb)，B(2．7kb)及C(2，9kb)等三个片段。经Hind I部分水解后连接，转化大肠杆菌HB101得到一系列带不同Hind 1片段的质粒的转化子，青霉素酰化酶活性测定证明其基因位于Hin d II—A片段上。合成青霉素酰化酶仍需苯乙酸诱导，并被葡萄糖阻遏，Hind I—B片段的存在能增加青霉素酰化酶基因的表达，而c片段无显著影响。

摘要:利用启动基因克隆载体pHE5，研究了不同酵母的启动基因在大肠杆菌巾的功能作用。酵母染色体DNA的HindI和Ec0R I片段与pHE5重组，获得一批启动基因重组体，并作了不同启动基因重组体的限制性图谱分折和抗四环索水平的测定。对这启动基因用于组建表达质粒的意义进行了讨论。

摘要:黄地老虎颗粒体病毒(Agrotis segetum granulosis virus简称AsGv)DNA和pPL603质粒DNA，用限制性核酸内切酶EcoR I酶切后，再用T4连接酶连接，转化枯草芽孢杆菌BRl51感受态细胞。然后在loμg／m1氯霉素的sPBY选择平皿上筛选，得到了抗氯霉素的转化子。经过琼脂糖凝胶电泳检测，转化于中的重组质粒比原载体pPL603质粒分子量大。由于重组质粒上的抗性表达水平可达250μg／m1氯霉素，比pPL603质粒抗性表达水平(5μg／m1)提高50倍。所以重组质粒携带了有启动作用的DNA片段。启动功能片段的分子量，经琼脂糖凝胶电泳测定约为O．9kb。除进行DNA—DNA分子杂交确证外，并用重组质粒pAsGVPl5进行了第二次转化、抗性水平测定和分子量分析。

摘要:本文报道庆丰链霉菌AS20l[11v]、MS30[Pr0一Ade—sm r］菌株和吸水链霉菌井冈变种VA4[His-]菌株原生质体的种间融合重组。AS201×vA4融合产生由二亲株营养标记互辅的稳定的原养型重组子，频率为1．09×10^-5．98×10^-6MS30 xvA4融台产物除原养型重组子，重组频率为5．7×10^-5外，还出现异核体及异质无性系(频率为2．8×10^-4一2．14×10^-5)。得到的原养型重组子，在孢子颜色、抗药性状、产物性质等方面显现广泛多样的变异。从中得到一个原养型重组菌株RvAl8，它所产生的抗菌物质，理化和生物性质与亲株产生的庆丰霉素和井冈霉素明显不同。

摘要:4个产黄青霉选育系谱的14列营养缺陷型原生质体融合率为0.01一8．88％。原生质体经紫外光照射后融合，有可能在非选择性的cM上分离出杂台二倍体。系谱内杂台二倍体的青霉素产量与直接亲本是否比原始亲本显著减产有关。系谱问杂合二倍体中双亲与产量有关的基因之间没有明显的显隐关系或累加效应。系谱I与I的杂合二倍体F16②—c24的分离子HP7②一1显示出比原始亲本更好的选育潜力。

摘要:从大肠杆菌As 1．76提取青霉素酰化酶，经纯化，用戊二醛圈定在氯烷基硅烷化多孔玻璃上。初步摸索了固定化条件。固定化酶的米氏常数为7．7 x 10^-4M，比自然酶大10倍，但竞争性抑制剂苯乙酸对固定化酶和自然酶的抑制常数基本相同，固定化酶的最大反应速度为5．8×10^-2M／min，比自然酶大2．5倍，水解NIPAB的最适pH为7．O，比自然酶低1个pH单位，最适反应温度比自然酶低i0℃，固定化酶在pH 5．8—8．0之间较稳定，较自然酶的范围略窄；固定化酶在40℃以下稳定，而自然酶在45℃以下稳定。

摘要:本文讨论了直接利用工厂报表数据构筑各氨酸发酵过程的数学模型以及估计模型中参数的方法。模型结构由理论分析得出，可用于分析模型和预测模型。参数估计主要介绍了辨识方法。考虑到模型方程可能病态，因此采用了平方根法滤波。文中还详细介绍了适用于实时在线辨识的递推平方根算法。仿真结果表明，利用上述方法求得的模型和工厂数据符合得很好。作为预测模型，利用前18h的数据就能成功地预测全过程的状态。

摘要:释放质子的酶反应常通过滴加碱溶液将反应控制在恒pH条件下进行研究。由于碱溶液的加入，随着反应的进行，反应体系的体积不断增加。本文研究了这种变体积的酶反应动力学，并用青霉素酰胺酶水解苄青霉素的反应进行了验证。