摘要:

摘要:以Pbr322及含有噬菌体T7 RNA聚合酶强启动子φ10的Pbr322衍生物作为克隆载体，经限制内切酶AvaⅡ+HaeⅢ切割的一段噬菌体T7 DNA片段分别克隆到Pbr322及其衍生质粒的BamHⅠ位点上。插入的DNA片段为632碱基对。该片段包括噬菌体T7基因3．5和T7 RNA聚合酶弱启动子φ3．8的全部编码序列。已知噬菌体T7基因3．5的功能为产生噬菌体T7溶菌酶，利用氯仿处理检测带有重组质粒的转化子胞内溶菌酶活力。证明两种克隆株整体细胞中，均有溶菌酶存在。用10一20％SDS-聚丙烯酰胺凝肢电泳检查噬菌体T7基因3．5蛋白带，结果表明T7基因3．5在Pbr322衍生质粒中的表达优于Pbr322。

摘要:

摘要:本文报道了幼畜腹泻双价基因工程疫苗(K88、K99)的高密度发酵生产工艺和抗原基因的过量表达研究结果。采用New Biunswick公司发酵罐，主要发酵参数为搅拌速度1000rpm，通气量为18L／min，溶氧为25％，pH6．5，罐压为48．3kPa，温度37℃，发酵时间为20h。菌体浓度为A 6 0 0 nm40以上，K88、K99抗原效价分别达212水平。发酵过程中发现表达的抗原除装配细菌伞毛之外，过量表达的抗原以相当于伞毛中抗原浓度游离存在于溶液中。含双价疫苗基因的表选型质粒的稳定性在发酵20h后保持在70％。本文结果表明利用小型发酵罐(10L发酵液)每次可制备10000支疫苗，完全可以满足对幼畜腹泻基因工程疫苗盼大量需要。

摘要:通过研究影响转化效率的诸因素，最终找到一种快速、高效酵母完整细胞转化法。整个转化步骤能在1．5h内完成。在实验中发现：小牛胸腺DNA的加入，在加入DNA后随即加入PEG4000;将42℃热冲击时间从5min延长到25min;热冲击后直接将转化混合物涂布到选择性平板上能得到高效转化效率。所用四种类型质粒的转化效率如下：Yrp；3．5—7．2×10⁴(线性pcN60／BamHⅠ：1·6×10⁵);Yep: l·7—2.6×10⁴(线性YEpl3／BarnHⅠ：8×10⁴)，Ycp：3．7×10⁴；YIp5／stuI：7．6×10³。用快速法检测的7株受体菌的转化能力都达到10⁴个转化子/μg DNA。

摘要:用牛αsl－酪蛋白cDNA作探针，从牛基因组文库中筛选出一段αsl－酪蛋白基因序列。由限制内切酶图谱和souther印迹分析可以确定其中含有完整的αs1-酪蛋白基因的5’调节区。

摘要:以丰产、优质，及抗白叶枯病和20个稻瘟病生理小种的水稻花培品种中花8号的成熟胚为材料，诱导愈伤组织，建立细胞悬浮系，分离、培养原生质体，获得了再生植株。中花8号原生质体的分裂频率和植株再生频率分别高于或可与模式品种Taipei 309相比拟。

摘要:从小麦徐州211的成熟种子诱导愈伤组织，建立了胚性悬浮细胞系。酶解悬浮细胞获得原生质体，用含o．8％琼脂糖的改良Ms培葬基进行琼脂糖珠培养，再生细胞分裂，并形成愈伤组织。诱导再生愈伤组织分化．得到了完整的再生植株。原生质体培养两周后，加入降渗培养液可促进克隆的形成。在分化培养基中，低浓度蔗糖可提高植株分化率。高浓度的激动索和玉米素对芽的分化有效并能抑制愈伤化。再生愈伤组织诱导分化时期的早晚影响植林分化频率。

摘要:利用发根农秆菌(Agrobacterium rhizogenes)的遗传转化作用，从甘蓝下胚轴切段上诱发产生了Ri T—DNA转化根。在无激素Ms琼脂培养基上，经过长达4个月的连续培养后，有些转化根的根段组织脱分化形成愈伤组织块，然后又再分化形成茎芽。在含有激动索的Ms琼脂培养基上，转化根不经过愈伤组织阶段直接分化出茎芽，其中以14μmoI／L激动素处理的生茎效果最佳。在Ms液体培养基内加入4．5μmol／L BA也增加了转化根上的茎芽数。所有这些茎芽能够进一步生长，并且在生根培养基上生根，长成小植株．

摘要:以庆丰链霉菌(SM^r，42℃不能生长，产庆丰霉索，可抑制细菌生长)与吸水链霉菌井冈变种(sM5，42℃生长良好，产井冈霉素，不抑制细菌生长)为亲株，在42％PEGl000诱导下进行原生质体融合，在含SM 100μg／ml，42℃培养的再生平板上直接选择耐温型融合子，融台率为1O^-5—1O^－4左右，经分离传代后可得到稳定的耐温型的单倍体重组子，即可在42℃生长，并且有链霉素抗性和抑制细菌生长的活性。初步测定了四个重组子产生的抗菌物质的性质，都与亲株产生的庆丰霉素、井冈霉素不同，其中F1－38，F1－16和IFM3－32三个重组子的抗生素在波长274mm处有一个紫外吸收小峰，而重组子F6-6有二个活性部分，其一在紫外线下呈荧光，另一则具有酸碱指示剂特性。

摘要:天然无抗菌活性的变青链霉菌1326与链霉菌1254的营养缺陷型变株进行种间原生质体融合，获得了原养型融合体，频率为10^-6—10^-5。融合前双亲株原生质体经52℃水浴处理4min，融台频率有所提高，约有一半的融合体菌株在琼脂平板上培养后显示有不同程度的抗菌活性，但绝大多数皆不稳定。从755株融合体中筛选到5株抗菌活性较稳定的菌株，并对其中三株所产生的抗生素作了初步鉴别。发现一株产生中性脂溶性抗生素，其余两株所产生的抗生素皆为碱性非典型脂溶性物质。尽管此等产物的理化性质还有待进一步鉴别，从中发现新化合物的几率是否大于传统的筛选途径，也还需要更多的筛选实践才能说明，但为了进一步开发利用微生物资源，这一途径似值得探讨。

摘要:本文介绍外科切割家兔胚泡产生同卵双胎。各期胚泡是从自然排卵的家兔采得的。移植切割早期胚泡的8只受体母兔，2只妊娠，怀孕率为25％；移植切割中期胚泡的7只母兔，3只妊娠，怀孕率47％；移植切割晚期胚泡的6只母兔，3只妊娠，怀孕率50％，共产仔兔七窝。总共移植83对同卵半胚，获仔兔24只，其中7对同卵双胎。实践证明，应用胚泡切割获得家兔同卵双胎的途径是可行的。

摘要:将sos型H^＋－ISFET与戊二醚交联的牛血清蛋白-青霉素酶膜组合成单管输出式青霉素酶－H＋－ISFET传感器的探头(以下简称青霉素－酶FET)，并用于测定溶液中的青霉素含量。青霉素－酶FET在0．005mol/L、O．Olmol／L、0．02mol／L磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为11—12mV／m mol／L、7．5—8．0mV／m mol／L以及3．7—4．OmV／m m01／L；响应时间为30s，在0．02mol／L磷酸缓冲液中的标定曲线线性范围为O．5—25mmo】／L’相关系数为O．9976。该青霉素·酶FET在青霉索浓度为10mmol／L的0．01mo1／L磷酸缓冲液中重复测定8次的标准偏差sD为1．67mv，变异系数cv为2．1％；贮存寿命大于4个月，使用寿命在1个月以上(每天测试一次)。

摘要:酶场效应晶体管(ENFET)是近年来发展起来的一类半导体技术和生物技术相结合的新型器件。双管差分输出式ENFET对环境温度变化及总体pH变化等外界因素有自动补偿作用，其输出电压随时间的漂移较之单管输出有很大的改善。此外，还可采用金电极作参比电极以实现探头的小型化。青霉索ENFET在0．01mol／L和O．02m01／L的磷酸缓冲液中的响应灵敏度分别为6．5—7．0mV／mmol／L和3．2—3．6mV／mmol／L，线性范围为0．5—14mmol／L和0．5—25mm0l／L。当浸于O．Olmol／L磷酸缓冲液、置于4℃下保存时，探头的贮存寿命大于6个月。探头的累计使用次数可超过1000次。本文还论述了青霉素ENFET在青霉素发酵液浓度 测定中的应用。

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