1990, 6(4).
摘要:本文采用启动子检测载体和增强子检测载体发现来自大肠杆菌JMl03 DNA的一个1.0kb左右的片段能在痘苗病毒启动子上游增强细菌CAT和β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达,这种增强效应无明显的方向性,一般可使基因表达水平提高3~6倍,此原核增强子样序列同时也具有启动子功能。此外还测定了增强片段的部分DNA序列。
1990, 6(4).
摘要:利用λEMBI3为载体构建了水稻寒丰6366的基因文库,重组噬菌体数日达4×lo。,超过了要求的理论值。用缺口平移法标记玉米Wx基因DNA片段作探针,从基因文库中筛选出阳性杂交克隆。对其中一个阳性克隆,λWx2的southern分析表明,它和玉米Wx基因编码区杂交。根据绘出的物理图,将杂交区内一个0.4kb的BS片段克隆到M13上,测定了DNA顺序。结果表明,该区域内水稻和玉米Wx基因外显子DNA同源性在80%以上。这说明我们确实得到了水稻Wx基因克隆,而且水稻和玉米的Wx基因是高度同源的。
1990, 6(4).
摘要:本文报道了含β-半乳糖苷酶基因的AcNPv转移质粒与家蚕NPv杂交重组并在家蚕幼虫及蛹体中进行表达的结果。在家蚕幼虫、蛹体中表达产物的量比在BmN细胞中高100倍以上,每毫升血淋巴液中表达产物可达4mg。同时还研究了表达产物在血淋巴液中的稳定性以及体液中的蛋白酶抑制剂随NPv的复制而增加的特性,获得了具有指导生产意义的结果,并扩大了AcNPv转移质粒的应用范围。
1990, 6(4).
摘要:本文报道人生长激素释放因子(Leu27,Met44)hGRF(1-44)基因的合成和克隆。选用大肠杆菌高效表达所偏爱的简并密码子,用计算机辅助设计合成基因的顺序,用固相亚磷酸酰胺法合成了hGRF的6个寡聚核苷酸片段,长度分别为39至51个桉苷酸,总共141个碱基对。通过酶促连接反应构建完整的hGRF基因,并直接克隆到pUC-19质粒中,克隆的宿主菌为E.Coll JM83。通过抗性筛选、阳性标记筛选、限制酶分析和分子杂交确定阳性克隆株。用M13双脱氧末端终止法对克隆基因序列分析,证实台成和克隆的hGRF基因序列完全正确。
1990, 6(4).
摘要:从牛垂体中分离出总的mRNA,经逆转录酶及大肠杆菌DNA聚合酶合成双链cDNA,以pBR322作为克隆载体并用加G.C尾的方法进行重组,把重组质粒导人大肠杆菌中,建立了牛垂体mRNA的cDNA文库。用标记的人工合成的牛催乳索基因片段作为探针进行杂交,并从库中筛选到几个阳性克隆,经酶谱分析和DNA序列分析证明克隆中有一个含有全长的牛催乳素cDNA序列。将所获得的克隆进行“剪切”,加上启动子,然后导人大肠杆菌JM 103中并在IPTG诱导下表达。用SDS-PAGE检测,证明有表达产物存在,再通过酶标测定证明该表达产物具有与天然牛催乳素相似的免疫学活性。
1990, 6(4).
摘要:数量性状受多基因控制且其表现型受环境影响较大。为了更加有效地分析数量性状的表现,本文构建了数量性状的基因模型。由于该模型既包含了基因的加性作用,也涉及到显性偏差和上位性偏差,从而能够比较全面地刻划数量性状群体的分布形态。文章还给出了辨识模型参数的方法及一些性质的讨论。通过对一系列实例的计算并与Castle-Wright公式的结果进行了比较。本文所构建的模型产生的误差明显比Castle-Wright公式的小。可见该模型确实能够提供更多有用的信息。
1990, 6(4).
摘要:大肠杆菌D-木糖异构酶基因由含D-木糖操纵子的质粒px0100被克隆到pwRl3质粒上。以Bal31核酸酶逐步缩短DNA片段的方法,获得了若干个含有不同大小DNA片段的亚克隆,并在质粒上直接测定序列,从中获得了1.6kbDNA片段的核苷酸全序列。其中包括长度为1320bp编码440个氨基酸的蛋白质。此外,在其5’端尚有209个核苷酸和3’端82个核苷酸,它们分别含有核糖体结合位点SD序列和D-木糖异构酶基因转录终止区。
1990, 6(4).
摘要:从大豆的叶片、种子、茎和根制备了来降解的、具有生物活性的PoJy(A)+mRNA。建立了高效翻译的麦胚无细胞系统。通过对不同组织mRNA翻译产物双向聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱(2D图谱)的比较,找出了每种组织的专一性或高丰度的蛋白质斑点。这些结果有助于克隆组织专一性的DNA调控序列和转基因植物的研究。
1990, 6(4).
摘要:用化学合成法,我们设计、合成了一个以植物偏爱的遗传密码子编码的天蚕抗菌肽B基因。通过把该基因与M13mpl9噬菌体载体重组、克隆,转化大肠杆菌JMl03,杂交检测和序列测定,得到二个与设计一致的克隆。
1990, 6(4).
摘要:当西洋参细胞培养在Ms培养液中,KN03含量提高一倍而去掉NH4NO3。时细胞生长速率和皂甙产量分别比在正常培养液中提高65.1%和166.2%。黑节草寡糖素和人参寡糖素均有利于西洋参细胞的生长和皂甙含量的提高,尤其能增加Rg组皂甙的含量。西洋参细胞悬浮培养以生产皂甙收获的最佳时期为培养25天以上,其合成皂甙的高峰在细胞生长的对数期稍后出现。细胞悬浮培养和发酵培养过程中均未见pH值回升的现象。pH值稳定的发酵培养和pH值任其变化的培养相比,其皂甙含量,生长速率和生物量均要高。最后对细胞的培养方式进行了比较。
1990, 6(4).
摘要:利用适量的(3.5~14%)成牛血清低分子成分超滤液(LMW-CS,排阻M=300 00)、10mg/L转铁蛋白(T)、10 mg/L胰岛素(I)、20μmol/L乙醇胺(E)、40 n mol/L硒酸钠(s,当以RPMll640为基础液时用)等诸补充成分替代胎牛血清加到基础液RPMll640或1:1(v/v)的IMDM与Ham’s F12混合液中构成本实验性“无血清”培养基。培养在此种培养基中的杂交瘤细胞其最高细胞密度可以达到甚至超过培养在含胎牛血清的生长培养基中的最高细胞密度。对于杂交瘤细胞生长,4%的LMW-CS基本满足要求;T、I、E、S四种补充成分中乙醇胺(E)是首位影响因子; LMW-cs与TIES两部分之间的协同作用极为显著,两者缺一不可。
1990, 6(4).
摘要:本文用苯醌作为电子传递介体,石墨电极为基础电极。葡萄糖氧化酶和苯醌吸附在石墨电极表面,再用戊二醛交联固定。制成的酶电极以电流法测定底物葡萄糖浓度,其线性响应范围为(0-15mmol/L)。本工作测定了介体改良酶电极对葡萄糖的响应值,酶电极的pH范围,介体的循环伏安图谱,以及温度对酶电极的影响。
1990, 6(4).
摘要:本文针对短梗霉多糖发酵过程,经研究建立了基于逻辑方程和Luedeking—Piret方程的动力学模型: dx/dt=肛x(1一x/xm) dP/dt=m1x十m2(dx/dt) ds/dt=-b1x-b2(dx/dt)-b3(dP/dt) 其流变特性由初始时的牛顿流体转变为典型的假塑性非牛顿流体并遵从指数方程,即:τ=Kγn随发酵过程进行,发酵液的表观粘度增大,体积氧传质系数减小。搅拌转速的增加有利于提高体积氧传质系数。流变指数n、稠度系数K、气液传质系数Kla。与菌体浓度x、多糖浓度P、搅拌转速N及表观粘度ηa间分别有如下经验方程; k=1.2×10-2X2.43 n=0.461(P/Pm)0.07(x/xm)0.216 KLaDi2=1.48×104(D:N2)0.71(ηW)0.15 Dg ηa
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