摘要:本文对巴西固氮螺菌周氨基因的结构和调控进行综述。其固氮基因的调控可分为两种水平：通过DRAT-DRAG系统的翻译后水平和通过NifA蛋白的转录水平。通过NifA活性进行调控的机理目前尚不明了。

摘要:构建了具有λPRPL启动子高效表达人鼠嵌合Fab片段的温度诱导表达型载体pHZ01。并在大肠杆菌中表达了三种嵌合Fab片段：抗前列腺特异抗原(PSA)的嵌合Fab．抗溶菌酶(HEL)的嵌合Fab和抗破伤风类毒素(TT)的嵌合Fab．三种表达的可溶 性嵌合Fab都具有特异结合抗原的能力，嵌合Fab的CHI和CK区均为人源的。较之鼠源 Fab具有更好的应用前景。

摘要:采用PCR重叠延伸法和基因重组技术构建了人尿激酶原cDNA序列中缺失150～156位氮基酸的突变体，以COS-7细胞中获得暂时性表达以及在CHO细胞中稳定高效表达，其表达水平为450～500IU／10⁶cell／24h，表达产物经SDS-PAGE电转溶实验和westemblot分析证明，细胞分泌的Pro-UK突变体与天然Pro-UK以及完整全长DNA序列表达Pro-UK的分子量相同，为54kDa．绝大多数为单链，比完整cDNA序列表达产物的单链比例明显增高，与纤维蛋白的亲和性有所提高。

摘要:采用PCR方法，首次从中国山羊肝组织扩增出β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,βLG)基因的5’侧区867bp片段，其中包括770bp的启动子和97bp的部分第一外显子．再克隆测序。然后，我们用计算机分析比较了山羊β

摘要:用生物治疗方法治疗肿瘤已被视为肿瘤治疗的第四大疗法，其主要是免疫治疗．包括抗体与偶合物，肿瘤疫苗等。而要想获得有效的肿瘤治疗药物．其关键是要寻找小型化的、高效的导向载体。我们的实验室以低分化腺胃癌的P110癌蛋白作为抗原，免疫SPF鸡，从卵黄中提取抗体IgY作为植物毒素的导向性载体；实验结果证明，IgY能特异性地选择识别消化系统的肿瘤组织，为进一步研究肿瘤的导向药物提供了另一理论依据。

摘要:由基因工程大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—CSF)以包涵体的形式存在于细胞中，通过破菌、洗涤获得包涵体．再经过溶解、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换柱层析得到了均一的产品，经高压液相和SDSPAGE电泳测定纯度均大于98％，rhGM—CSF的比活为3．2×10⁷IU／mg,纯化获得的rhGM—CSF为一酸性蛋白，等电点约为5．2，NH₂-末端前20个氪基酸序列测定结果与文献报道一致。rbGM—CSF的NH2-末端不均一．其中带Met的分子约占59．5％，第一个氨基酸为Ala的分子约占24．6％，为Pfo的分子约占14．6％。纯化过程中蛋白的纯化倍数为3．9，生物活性总得率为69．1％，工艺重复性好，易放大。

摘要:以不含起始密码ATG的质粒Psxivvi⁺X3为转移载体，将编码金鱼生长激素I的Cdna插入粉纹夜蛾核型多角体病毒(TnNPV)基因组中，构建了形成多角体的重组病毒株TnNPV—SX⁺gfGHl21a。该毒株能利用合成多角体XIV串联启动子，在重组病毒感染的草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda,Sf)昆虫细胞及银纹夜蛾幼虫中表达金鱼生长激素I基因。感染离体细胞及虫俸后的蛋白SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳表明．所表达的蛋白分子量为22．5kDa，与理论计算值相符。Westem印迹证实。金鱼生长激素特异蛋白得到表达。

摘要:利用DNA重组技术．将牛α-S1酪蛋白调控区基因(16kh的片段)与乙肝表面抗原基因拼接，构建了融合基因表达构件：λ106。构件经转基因技术转入山羊受精卵。待受精卵发育至成熟个体并分娩、泌乳，ELISA检测其乳汁中的HBsAg，证明所构建的牛α-S1酪蛋白基因表达构件是可以在羊乳腺中表达乙肝表面抗原基因，并将其表达产物分泌到乳汁中。

摘要:首先优化了面包酵母生产过程中分批培养阶段的操作条件，然后在连续培养实验的基础上．确定了面包酵母流加培养的最佳参数，并得出了发酵活力与比生长速率之间的关联式。根据这一关联式和指数流加培养模式，提出了两阶段控制比生长速度的流加培养策略。研究结果表明：采用初糖浓度为15～30g／L、残糖控制浓度为3～6g／L以及分阶段控制搅拌转速以提供不同的传氧速率；应用提出的流加培养策略进行面包酵母培养．在产率达到0．432g/g的同时发酵活力达到1180ml，可实现面包酵母培养过程高产率和高发酵活力的统一。

摘要:将米曲霉经液体培养生长成直径l～2mm的浅黄色菌球．用明胶．甲醛固定，得到拆分N-乙酰-DL-丙氨酸酶活力较高和反应性能较好的固定化细胞。考察了各种因素对固定化细胞酶活力的影响。当底物浓度小于0.15mol/I,底物抑制现象不明显，此时拆分反应速率符合Michaelis Menten方程。

摘要:将乙型肝炎表面抗原基因插入具调控型启动子PH05的乳酸克鲁维酵母表达载体中，构建完成质粒pLSl．转化宿主菌Kluyveromyces lactis CXJ1—7A，ELISA结果表明．其表达水平受无机磷浓度的调控。为了进一步提高表达水平，我们将Pls1中的乙型肝炎表面抗原表达单元插入带完整Pkd1序列的载体Pe1，并将构建成的质粒Pls2转化MW98—8C。在比较了CXJ-7A／Pls1和MW98—8c／Pls2后，我们发现MW98—8c／Pls2的稳定性大大提高．表达量也增加4～8倍。

摘要:重组人白细胞介素-2(rhIL-2)基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在，经过菌体发酵和收集、超声破菌、包涵体抽提、稀释透析初步复性、反相高压液相色谱纯化，终产物纯度大于99％。反相高压液相色谱不仅可以纯化rhIL-2，且使产物的总活性提高7．9～9倍，比活性提高14～18倍，达到1.5×10⁷u／mg蛋白质，蛋白得率为50％～56％。结果表明．反相高压液相色谱具有纯化和显著提高rhIL-2折叠效率的双重功效，为非SDS变复性法生产rhIL-2提供了简便有效的方法。

摘要:通过对50株野生型藤仓赤霉菌的筛选，获得一株GA9组分较高而GA3、GA+7组分较低的菌株农大201(ND-201)，然后通过多次紫外诱变，使其产量从原来的34μg／ml提高到260μg／ml。当发酵条件采用变温培养(培养72h后由28℃转到34℃、调节pH值(72h后pH由4．5调到6．2)．产量可达300μg／ml。在培养基接最佳组分配制后，GA9的产量可达350μg／ml。发酵产物经提取、层析并经气相色谱-质谱联机(GC-MS)鉴定确证为GA9。硅胶G薄层层析和荧光光度法可简便地对GA9进行定量测定。HPLC法可测得GA9组分的比例含量。

摘要:以固定化胆碱氧化酶(EC 1.1.3.17)与H₂O₂电极构成电流型酶电极生物传感器．其输出电流可达500nA。用于胆碱测定的线性范围：0～200mg／L，精度：RSD小于1．5％．响应时间：40s，使用寿命大于60d，实际测定氯化琥珀胆碱注射液中胆碱含量，回收率：1OO．3％～102．3％。

摘要:抗肿瘤抗生素c-1027具有极强抗肿瘤活性．其分子结构由一个酸性蛋白和脂溶性发色团构成，本文首次将RAPD技术(随机扩增的多态性DNA技术)运用于抗生素生物合成基因克隆表达研究。采用7种引物对5种C-1027无活性阻断变株总DNA进行扩增．其中引物GA2扩增C-1027原株及阻断变株后，琼脂糖凝腔电泳结果表明，F2DNA片段存在于原株而在变株AF67中缺失，采用载体质粒pU459将该DNA片段F2克隆至变铅青链霉菌．获得含重组质粒pIF2的菌株No155。No155菌株和无括性阻断变株AF67共培养后，发酵产物恢复了抗菌活性及抗瘤作用。SDS-PAGE及紫外光谱证实产物为C-1027。这表明F2DNA片段古有编码C-1027生物合成的基因。

摘要:以P_RP_L,Trp启动子在大肠杆菌中表达鲤鱼生长激素重组DNA，经过高密度发酵.包涵体的提取，恢复天然结构。每升发酵可碍2g鱼生长激素。在上海地区以浸渍方法处理对虾苗并在人工饲料中添加鱼生长激素，提高虾苗的存活率并增加产量，提高了饲料的转化率。

摘要:Laabe于1987年提出了生物催化剂工程(Biocatalyst engineering)和介质工程(Medium engineering)的概念^[1]。有机相生物催化中溶剂的选择也是介质工程的内容之一。纯酶在有机相中的催化作用已有大量报道^[2]，但对完整细胞研究甚步。本文以甲基单胞菌(Methylomonas Z201)完整细胞为生物催化剂．丙烯环氧化为指标反应．研究有机溶剂对活性的影响并对催化活性——溶剂疏水性进行了相关性分析。研究了水一十六烷两相体系中十六烷含量和搅拌速度对丙烯环氧化速度的影响和细胞的操作稳定性。

摘要:骨形成蛋白(Bone Morphogenetic Protein，BMP)是一类能诱导异位骨及软骨形成，并在动物的发育和分化中起作用的蛋白质^[1,2,3]。自Urist及其同事发现骨形成蛋白以来⁴。已对8种人的BMP进行了克隆，除BMP-1外^[5]，BMP-2至BMP-8均与TGF-β家族相关，它们能诱导细胞分化，促进骨、软骨及牙本质的形成^[1,6]。并在发育、分化和形成过程中起重要作用。最新的研究认为BMP-1是一种胶原蛋白酶^[7]，进一步揭示了BMP家族成员的生物学作用。人的BMP-3基因定位于第4染色体上，BMP-3蛋白由472个氨基酸组成，包括N端的信号肽、中间的前肽及C端的成熟肽三部分。BMP-3的C末端与MBP-2A及BMP-2B有49％的序列相同^[5]。本实验室曾检测了BMP-3和BMP-5在不同 组织和细胞中的表达情况，发现它们在一些与骨形成无关的组织和细胞中均有表达，说明了BMP在动物和人中有着其他重要的作用^[8]。在此基础上，我们对BMP-3进行了克隆及在大肠杆菌中高效表达BMP-3-GST融合蛋白，并用Western印迹证明了其活性。

摘要:生黑醋菌可以将D-山梨醇转化为L-山梨塘，用微生物将D-山梨醇氧化为L-山梨糖是维生素C生产的一个重要部分，目前工业上用的都是游离菌批式生产工艺。由于固定化活细胞作为生物催化剂具有生产的连续性和稳定性．操作简便．产物易于分离纯化等优点^[1]，已有不少实验室研究甩固定化微生物细胞将D-山梨醇转化为L-山梨糖^[1-6]，国内也有用海藻酸固定化生黑醋菌Acetobacteriummelanogenum的报道^[2,3]。用海藻酸钙^[1-3]、聚丙烯酰胺^[4]、铝处理的海藻酸钙^[5]、水合聚丙烯酰胺与海藻酸钙混合固定化的微生物细胞^[6]转化D-山梨醇成为L-山梨糖，都有因机械强度差，而不适合在搅拌式发酵罐中生产的弱点。聚乙烯醇制备的固定化微生物细胞具有机械强度好、类似于橡皮的弹性、成低等特性^[7]。因此，我们选择聚乙烯醇作为固定化生黑醋菌的材料。

摘要:连续自由流电泳(Continuous free-flow dectrophoresis，CFE)自1980年起有了相当大的发展，其主要特点是将只能分析少量物质(1μg)的分析型电泳转变成能分离lg左右物质的制备型电泳，以达到分离和纯化各种生物产品目的^[1]。近年来CFE广泛应用于蛋白质和细胞分离，是一种很有前途的制备级电泳方法^[2,3]。在连续自由流电泳中，一种恒定pH称为载体缓冲液的液体．沿垂直方向缓慢流过一矩形的电泳薄腔，电泳腔的两侧是电极室，能被横向地加上直流电场，欲分离的蛋白质混合物通过一根细管从样品入口处连续注入腔体，随缓冲液措径向流动，同时又向与液流垂直的方向迁移．每种蛋白质的侧移距离与它的泳动率、电场强度及它在分离腔中的保留时间成正比。在分离腔出口处，混合物中各种蛋白质根据它们的泳动率被分配在各股液流中并由腔体出口处的一组收集管收集。但是有许多次级现象能损害连续自由流电泳的分离结果，诸如沉降效应、电渗流、焦尔热和自然对流。本文报道了仪器的研和我们对模型蛋白分离条件进行了优化，并成功地将人和兔的红细胞分开。

摘要:6-氨基青霉烷酸(6-APA)是半合成青霉素的关键中间体，通常采用固定床反应器在青霉素酰化酶作用下水解青霉素来制备^[1]。由于该反应是典型的产物抑制可逆反应，工业生产中需不断加碱中和苯乙酸，以维持反应在最适pH条件下进行。为进一步提高青霉素的水解速率，除了维持最适反应条件外．消除产物抑制具有重要作用。近年来一些研究者提出采用伴有分离作用的反应分离组合系统水解青霉素 制取6-APA。Ishimura等^[2]采用电渗析膜耦合式生物反应器连续移除苯乙酸．将反应速率提高了近1倍；陈坚等^[3]研究了固定化酶-离子交换组合系统移除苯乙酸过程。本文报道青霉素在生化反应与液相谱分离过程相耦合而形成的色谱反应分离器中的水解特性。

摘要:P₂-DNA即Phage 2型噬菌体的染色体DNA，是一条线状双股螺旋的DNA分子，分子量为2．2×10⁷Da。有19个碱基的牯性末端．可以连接成环状^[1]．1970年Bertani L.E. 和 Bertani G分离纯化得到P₂噬苗体并对其遗传学及理化特性进行了研究^[2]，发现它在DNA复制，溶源性的控制以及基因重组等方面与温和性λ菌体不同；1979年Saint R B 等和Westoo A等先后研究了P₂-DNA的几种限制酶的切割图谱^[3]。P₂-DNA可望成为分子生物学研究的重要工具和实验材料。目前国内尚无这种材料．我们试图将少量的P₂-DNA转染获得P₂噬菌体，加以扩增纯化．抽提得到大量的P₂-DNA。为分子克隆和限制酶的研究提供有实用价值的材料和研究工具。