摘要:病毒复制子 (Replicon) 是指来源于病毒基因组的能够自主复制的RNA 分子，保留了病毒非结构蛋白基因，而结构蛋白基因缺失或由外源基因替代。昆津病毒 (Kunjun virus) 为黄病毒科黄病毒属成员，其复制子具有表达效率高、细胞毒性低、遗传稳定等特点，在病毒基因组复制调控机制、外源蛋白表达、新型疫苗和基因治疗等领域得到了广泛应用。以下就昆津病毒复制子系统的构建、特性及应用方面的研究进展作一综述。

摘要:多胺是一类小分子生物活性物质，广泛存在于生物体内，与植物的生长发育、衰老及抗逆性都有着密切的联系。目前，在植物中的多胺合成途径已经基本揭示，其生理作用在分子水平上逐步得到阐明。对多胺合成突变体和各种转基因植物的研究也使得人们更深入地了解了多胺以及其合成代谢相关酶在植物生长发育等生理过程中的重要作用。以下概述了植物多胺代谢途径，重点综述了代谢途径中各基因的功能及遗传操作的最新进展，并对将来的研究方向尤其是相关基因在植物抗逆境 (包括生物和非生物逆境) 基因工程方面的应用作了讨论。

摘要:漆酶 (EC 1.10.3.2) 属于多铜氧化酶家族，可以催化氧化酚类和芳香类化合物，利用自由基反应机理完成4 个电子的转移，并将分子氧还原成水。漆酶具有非常保守的拓扑学结构，结合作者自身工作实践，对漆酶结构与功能的最新研究进展进行综述，其中对漆酶的三维结构、活性中心、催化机理研究和最新的应用进展作重点阐述。

摘要:空气中CO₂ 浓度升高导致的气候变暖问题已经成为全球性的环境、科学、政治、经济问题。近年来，对可用于直接固定工业废气尤其是燃烧烟气中CO₂ 的捕捉和封存 (CCS) 技术进行了广泛的研究。在这些技术中，微藻生物固定CO₂ 是一种具有大规模应用前景和经济上可行的CCS 技术。以下从藻种的筛选、烟气条件对微藻固定CO₂ 的影响、高效光生物反应器的开发和微藻产物的利用等方面对微藻生物固定烟气中CO₂ 的

摘要:性传播途径已经成为全球人免疫缺陷病毒1 型 (Human immunodeficiency virus type 1，HIV-1) 传播的主要方式。对HIV-1 黏膜感染机制的深入理解，将有助于研发新型有效的生物技术阻断其感染和传播。目前，HIV-1 黏膜感染机制的研究主要依赖于体外细胞培养和灵长类动物模型。近年来，一种新型黏膜活组织模型 (包括人体生殖道或肠道黏膜等组织) 的建立，可再现HIV-1 突破黏膜屏障进入基底侧的生物学过程，适用于HIV-1 黏膜感染机制与黏膜局部感染阻断生物技术的临床前有效性

摘要:旨在建立一种检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的敏感、特异的ELISA 方法。克隆、表达了口蹄疫病毒非结构蛋白3AB 基因，原核表达的重组蛋白经亲和层析法纯化及Western blotting 鉴定后作为包被抗原，建立检测口蹄疫病毒非结构蛋白抗体的3AB 间接ELISA 方法，通过与商品化试剂盒3ABC-ELISA 的比对试验对其进行评价。结果显示，重组蛋白3AB 以包涵体形式表达；能与口蹄疫病毒感染血清发生特异性反应，而不能与疫苗免疫动物血清发生反应；在检测田间样品时，与3ABC-ELISA 具有同样的特异性

摘要:通过向重组α-环糊精葡萄糖基转移酶 (α-CGT 酶) 液中添加化学添加剂以提高其热稳定性及贮存稳定性。在不同温度下研究了添加剂对酶液的贮存稳定性影响，并用圆二色谱 (CD) 研究了CGT 酶在近紫外区和远紫外区蛋白质结构与热稳定性的变化关系。当单独加入各种添加剂在50 ℃水浴1 h 和室温放置108 d 后，发现含有20％甘油的酶液稳定性最好，与未加任何添加剂的对照酶液相比仍有91％和50％的酶活，对照酶液在50 ℃水浴1 h 后仅有小于10％的活性，室温放置108 d 后已经没有酶活。明胶、CaCl<

摘要:为了构建高产的紫穗槐-4,11-二烯酵母工程菌，主要探究了含紫穗槐-4,11-二烯合酶基因的不同表达载体在酵母工程菌中是否存在协同效应。首先构建了含紫穗槐-4,11-二烯合酶基因的酵母表达载体pGADADS，分别将pGADADS 和pYeDP60/G/ADS 转入酿酒酵母W303-1B 和WK1 中，获得6 种能产生紫穗槐-4,11-二烯的酵母工程菌：W303B[pGADADS]、W303B[pYGADS]、W303B[pYGADS+pGADADS]、WK1[pGADADS]、WK1[pYGADS]和WK

摘要:拮抗链霉菌S24 对黄曲霉、赭曲霉、黑曲霉等粮食和饲料中常见的曲霉菌具有广谱抗性。优化了该菌株抗菌物质高产发酵培养基配方，并分析该菌株产生的抗真菌物质对黄曲霉的抑菌作用。通过单次单因子试验、正交试验，对S24 菌株抗菌物质的发酵培养基进行了优化，利用显微镜观察，研究了S24 菌株产生的抗菌物质对黄曲霉菌丝及孢子的抑制作用。获得适合S24 菌株抗菌物质产生的最佳培养基配方为：淀粉10 g、葡萄糖40 g、黄豆饼粉24 g、酵母浸膏粉8 g、KH₂PO₄ 4 g、C

摘要:黄瓜花叶病毒 (Cucumber mosaic virus，CMV) 编码的2b 蛋白具有RNA 沉默抑制子功能，为了研究翻译后修饰对2b 功能的影响，利用反向PCR 定点突变方法对CMV-Q 株系2b 蛋白的1 个预测的磷酸化位点 (S40) 和2 个预测的泛素化/SUMO 化位点 (K22，K39) 进行了点突变，同时将点突变体插入植物表达载体。通过农杆菌共注射法对3 个2b 突变体的抑制子活性进行了分析，结果证明，当S40 突变为A (2b^S40A) 后，2b

摘要:分泌型IgA (SIgA) 在机体的粘膜免疫中具有重要作用，在外分泌道中比单体IgA 和IgG 抗体具有更好的抗感染活性。为了表达抗禽流感病毒H5N1 人-鼠嵌合分泌型IgA 抗体，首先以本室先前构建的稳定表达IgA 的中国仓鼠卵巢细胞 (CHO) 细胞系为基础，共转染分泌片和J 链表达质粒，然后用抗生素Zeocin 选择阳性克隆细胞，利用倍比稀释的方法筛选分泌SIgA 的单克隆细胞，通过Western blotting 分析培养上清中SIgA 的表达情况。结果表明，在CHO 细胞中成功表达了SIgA 抗

摘要:破伤风是由破伤风杆菌侵入人体伤口、生长繁殖、产生毒素而引起的一种急性特异性感染，其死亡率高，严重危害人民生命健康。研究证实破伤风毒素重链C 端 (Hc) 具有与毒素受体结合的活性，完全保留了全分子的免疫原性，有望开发成为新的基因工程破伤风亚单位疫苗以替换传统的甲醛灭活类毒素疫苗。由于野生型Hc 蛋白 (HcW) 易形成分子间及分子内二硫键，且各构象分子之间易发生不稳定的转换，为疫苗的生产工艺带来困难，因此，通过将破伤风HcW 蛋白的869 位半胱氨酸突变为丙氨酸，构建构象稳定的破伤风亚单位疫苗突变体HcM

摘要:旨在探索骨唾液酸蛋白 (Bone sialoprotein，BSP) 基因沉默对亲骨转移乳腺癌细胞 (MDA-MB-231BO) 与骨基质粘附能力的影响，为以BSP 为靶点的乳腺癌骨转移预防和靶向治疗提供实验依据。体外检测BSP 基因沉默对乳腺癌细胞与小鼠骨基质粘附能力的影响，MTS 法检测细胞增殖能力；扫描电镜观察骨片表面肿瘤细胞粘附情况和骨吸收状况；ELISA 法检测骨基质细胞粘附培养上清中TGF-β₁ 和RANKL 表达分泌量差异；左心室注射法构建裸鼠骨转移模

摘要:主要考察流加培养基中不同营养成分、流加起始时间及初始接种密度对11G-S 细胞无血清流加培养的影响。在研究中以悬浮适应的表达尿激酶原 (Pro-urokinase，Pro-UK) CHO 工程细胞系11G-S 为研究对象，在100 mL 的摇瓶中无血清悬浮流加培养11G-S 细胞，同时以活细胞密度、细胞活力及Pro-UK 活性为评价依据。结果表明在培养基中氨基酸、无血清添加成分及无机盐对促进细胞生长、细胞活力维持及蛋白表达起着较为重要的作用；且流加起始时间为72 h 及初始接种密度为3×10^5<

摘要:pUDK-HGF 是携带人肝细胞生长因子的裸质粒，目前已进入I 期临床试验，因此需要大量符合药学规格的质粒DNA。文中建立了pUDK-HGF 中试规模纯化制备的新工艺。流程包括：发酵、离心收获菌体、碱裂解、超滤浓缩碱裂解液、Sephacryl S-1000 层析除去RNA 并更换缓冲液、plasmidselect 捕获超螺旋质粒DNA、琼脂糖凝胶6BFF 除盐。新工艺可获得浓度为2.0 mg/mL、纯度在1.70 以上的裸质粒原液，符合相关质量标准，并避免使用动物源性的酶及有毒试剂。

摘要:为了构建人乳铁蛋白基因 (hLF) 的乳腺表达载体并验证其在乳腺细胞中的表达情况，本载体以山羊β-casein基因上游包括启动子、外显子1、内含子1、部分外显子2 作为5′端调控序列，下游包括部分外显子7、内含子7、外显子8、内含子8、外显子9 及3′部分基因组片段作为3′端调控序列，长度分别为6.2 kb 和7.1 kb，将hLF 基因 (目的基因) 和Neo 基因 (筛选标记) 分别插入到5′端调控序列和3′端调控序列的下游，构建成pBC1-hLF

摘要:虎纹捕鸟蛛毒素-XI (HWTX-XI) 是从虎纹捕鸟蛛粗毒中分离的含55 个氨基酸残基的蛋白质，兼有胰蛋白酶抑制活性和电压门控钾离子通道抑制活性。通过突变HWTX-XI 上的钾离子通道抑制活性关键氨基酸残基设计了2 个突变体 (分别突变以下氨基酸残基：R₅I,R₁₀T,R₂₅A 和R₅I,R₂₅A)，利用pVT102U/α 表达载体在酿酒酵母S78 中成功表达并获得了高纯度的重组蛋白质；通过分光

摘要:通过RT-PCR 从经ConA 刺激诱导的奶牛脾脏淋巴细胞总RNA 中扩增出牛γ 干扰素 (BoIFN-γ) cDNA，克隆到真核载体pVAX1 中， 测序结果显示pVAX1 中的插入序列BoIFN-γ 基因与已报道序列一致。用重组质粒pVAX1-BoIFN-γ 转染COS-7 细胞并进行间接免疫荧光试验鉴定，结果显示BoIFN-γ 在COS-7 细胞中得到成功表达。将BoIFN-γ 基因克隆到原核